门冬酰胺合成酶启动子区单核苷酸多态性与基因表达量的相关性研究论文.docVIP

　　门冬酰胺合成酶启动子区单核苷酸多态性与基因表达量的相关性研究论文 罗长缨 李本尚 帖利军 顾龙君 【摘要】 细胞内门冬酰胺合成酶（asparagines synthetase， AS）的表达水平与白血病细胞对左旋门冬酰胺酶（Lasp）耐药有关。本研究旨在通过筛查发现AS启动子区的单核苷酸多态性（SNP）位点，研究它们对AS基因表达量的影响及寻找对Lasp治疗反应具有影响的个体遗传因素。 对82份白血病标本和45份非白血病标本直接测序，筛查AS启动子区的SNP；用实时定量PCR法测定相应标本中的AS mRNA水平。通过对被筛SNP位点不同基因型个体的AS表达水平的统计分析，判断被筛SNP是否对基因表达产生影响。结果发现： 被测AS启动子片段内共发现3个SNP位点。分别是-239C/T，-92G/A和-62A/T。其中-92A等位基因在白血病患儿中的发生频率高于非白血病(P 0.05)。AS表达在该SNP的各种基因型个体间存在差异，基因表达水平由高到底依次为GA杂合子型 AA纯合子型 GG纯合子型（P 0.01）。结论： -92A等位基因变异可能与白血病的某些特征相关，并且这个等位基因变异的存在与AS基因的高表达相关。 【关键词】 急性白血病； 门冬酰胺合成酶； 启动子区； 单核苷酸多态性 Single Nucleotide Polymorphism in the Promoter Region of Asparagine Synthetase and Its Impact on the Gene Expression Abstract High expression of cellular asparagine synthetase (AS) is a causative factor for the resistance of leukemic cell to Lasparaginase therapy. This study ed to find single nucleotide polymorphism (SNPs) in the promotor region of asparagine synthetase (AS) gene and to determine if these SNPs have influence on the transcriptional activity of AS promotor. The DNA sequences of AS promoter (pAS) from 82 leukemic children and 45 controls ined to screen for SNPs in this region and the AS mRNA level in these samples e PCR assay. The results indicated that three SNPs ent. They ic samples than that in nonleukemic control (P 0.05). The gene expression level differed among the individuals ozygote GG homozygote. It is concluded that some features in leukemia might associate ia; asparagine synthetase; promotor region; single nucleotide polymorphism 左旋门冬酰胺酶（Lasp）是儿童急性淋巴细胞白血病(ALL) 和T细胞性淋巴瘤化疗方案的重要组成部分。对Lasp耐药的ALL患儿往往长期预后较差［1，2］。Lasp作用机制是通过分解血浆中的天门冬酰胺和谷氨酰胺，导致细胞内氨基酸的缺乏从而抑制细胞的增殖。然而大多数细胞通过表达门冬酰胺合成酶(asparagines synthetase, AS)利用细胞内的天门冬氨酸、谷氨酰胺和ATP重新合成上述氨基酸从而维持细胞生命和增殖。已有研究证实，细胞内AS的表达高低与细胞对Lasp的耐药密切相关［3, 4］。 此外，Lasp在临床上为一个引起较多严重不良反应的化疗药物，因此围绕该药药物疗效和药物代谢方面个体差异的研究有着重要的意义。本研究旨在筛查人群中AS基因调控区的单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms, SNP)，并研究这些。 材料和方法 研究对象 82份白血病患儿骨髓标本取自诱导缓解治疗之前，其中3份为复发白血病标本。临床病例包括ALL 53例，ANLL 26例，CM