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091075902wgd-8a型光栅光谱仪的荧光光谱实验研究 - 石河子大学
项目编号_____
石 河 子 大 学
国家大学生创新性实验计划项目
申 请 表项目名称? WGD8A型光栅光谱仪的荧光光谱实验研究
项目负责人????? ????
学院、年级、专业?联系电话???????
电子邮件??705761109@QQ.com
填表日???? 2009-10-15?? ?????????
石河子大学教务处制表
?
?填表说明?
???项目名称 WGD-8A型光栅光谱仪的荧光光谱实验研究 申请经费 4万元 起止时间 2009年 11月至 2010 年 12 月 负责人705761109@ 理论分析
参加成员_tea@ 张岩文 物理实验中心副主任/讲师 师范学院
近代物理实验zyw_tea@ 一. 项目申请理由,,涉及到的荧光光谱检测技术有全内反射荧光显微术、荧光共振能量转移术、多光子荧光成像术、荧光相关光谱、光漂白后荧光恢复技术、荧光寿命成像显微术、单分子荧光偏振等。这些荧光分析技术以其快速、无损、时空分辨率高的特点,成为了研究单个生物分子行为的重要手段。
荧光光谱检测实验已经被列为许多高等学校的近代物理设计和研究型实验课程。一般而言,在此类实验中常常需要专门的激光器、共聚焦显微镜、荧光分光光度计等昂贵的光学仪器,在很大程度上提高了实验的成本和难度,所以荧光光谱检测实验教学往往难以开展。而目前教学领域中广泛使用的WGD - 8A 型光栅光谱仪,可以测量金属蒸气和化学发光光谱,但无测量荧光光谱的功能。鉴于此,我们利用GY- 4 型低压汞灯激发可以产生较强荧光的荧光物质发光,然后基于WGD - 8A 型光栅光谱仪搭建荧光光谱检测系统,实现对荧光光谱的检测。
近年来,物理系在微弱光信号检测方面已经开展了一些相关的工作,比如稀土荧光配合物(5D)-He,Ar,H2碰撞中5D→7S的激发能量转移截面;利用MATLAB和计算机声卡对光电二极管产生的微弱光电信号做数据采集,编程实现数字相关荧光检测和相关测试的实验等,对荧光光谱的检测实验研究做了前期参考性的工作。
本项目基于WGD - 8A 型光栅光谱仪,搭建一套低成本的测量荧光光谱的检测实验装置,实现荧光光谱检测。光源可选用GY- 4 型低压汞灯、高压汞灯或普通的稳定氦氖激光器。不同的荧光物质,其激发波长不同,可以根据需要选取不同的光源进行激发。实验中荧光检测器采用光电倍增管检测。在计算机的控制下电机缓慢转动闪耀光栅(刻线密度为2400 条/ mm) ,从而在出射方向获得连续变化的光致发光光谱图,并分析不同的光致发光材料的发光机理。选用若丹明B、0.1微米粒径的荧光微粒等作为荧光物质。
2. 现状及研究目的
荧光物质在一定的激发光照射下可以发射出比激发光波长更长的荧光,即光致发光现象,它的光谱、强度、偏振程度及寿命等和被研究物质的结构、物理状态、分子运动速度、分子运动轨迹、温度等密切相关。正因为如此,荧光光谱测量技术不仅在物理学、化学中有着广泛的应用,而且在生物学、医学等领域中与核磁共振、电子自旋共振、红外光谱等技术共同配合,在生物大分子结构、膜生物物理、细胞生物物理、等研究领域中,成为不可缺少的技术。荧光检测方法因具有快速、无损、时间分辨率高的特点而成为研究分子的重要手段。
近年来对活细胞单分子行为及实时检测研究的几种荧光检测技术,有全内反射荧光显微术、荧光共振能量转移术、多光子荧光成像术、荧光相关光谱、光漂白后荧光恢复技术、荧光寿命成像显微术和单分子荧光偏振等。例如,它可以方便地测量纳摩尔浓度下荧光标记分子的分子间或分子内反应的局部浓度、扩散系数、化学反应速率常数、特征速度等多种参数。在实验中尽可能减小受激发样品的范围、采用高效率收集光子的方法、应用高量子产率的探测器等,同时尽可能减少样品中的杂质和样品池材料的本底荧光。实验中往往把其它仪器与共聚焦显微镜进行联用,在很大程度上提高了实验的成本和难度,一般的实验室都很难开展此类实验。
用低成本的荧光光谱检测实验装置,开展相关的荧光光谱实验研究,可以填补我校近代物理实验教学该技术的空白。荧光光谱实验实验中不仅要正确选用、安装调试仪器及选用合适的操作参数,还要求学生有良好的实验习惯以及对工作的仔细认真程度,这些因素都是能否成功完成荧光检测实验的关键;与一般的物理实验不同,实验中涉及到化学方面的药品和试剂,需要学生对化学一般知识有所了解,另外还有一些需要自制的实验装置,需要学生自己动手加工制作。因此,通过该实验的训练,培养了学生的实验设计能力、动手能力和创新素质,为以后从事科研活动奠定一定的基础。
二、项目研究内容()WGD - 8A 型光栅光谱仪的荧光光谱检测实验装置中,,光源的选取与调节、光路的设
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