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骨髓增生异常综合征患者的间充质干 细胞具有免疫抑制作用论文.doc
骨髓增生异常综合征患者的间充质干 细胞具有免疫抑制作用论文
张翼鷟 达万明 黄文荣 高春记 郭博
【摘要】 本研究探讨骨髓增生异常综合征(MDS)患者间充质干细胞(MSC)的免疫抑制作用。 采集MDS患者的骨髓标本,分离、培养和扩增MSC,观察细胞形态并进行表型鉴定;将不同数量的细胞加入单相混合淋巴细胞反应(MLR),检测MSC对自体及采自健康供者的异体外周血淋巴细胞 (PBL)增殖水平的影响。结果发现:3×103-1×105个 源于MDS患者的 MSC可将自体PBL的增殖抑制到最大反应的(66.9±20.1)%-(30.2±5.9)%, 将异体PBL的增殖抑制到最大反应的(56.6±14.7)%-(20.5±9.7)%,与培养自健康供者MSC的抑制作用相比,差异无统计学意义(P 0.05)。结论: MDS患者的MSC和健康者的MSC具有相似的免疫抑制功能。
【关键词】 骨髓增生异常综合征;间充质干细胞;免疫抑制; 混合淋巴细胞反应
Bone Marroal Stem Cells Derived from Patients e Possess Immunosuppressive Activity
Abstract This study ed to evaluate esenchymal stem cells (MSCs) obtained from patients yelodysplastic syndrome possess immunosuppressive effect. MSCs from bone marroples of MDS patients orphologically analyzed and their immunophenotype ined by floounts of MSCs ixed lymphocyte reaction. MSCs from MDS patients phocytes (PBLs). The results sho MDS patients could inhibit autologuous PBLs proliferation to (66.9±20.1)%-(30.2±5.9)% of maximal response, as aximal response, as pared healthy donors, there patients yelodysplastic syndrome also possess immunosuppressive activity.
Key yelodysplastic syndrome; mesenchymal stem cell; immunosuppression; mixed lymphocyte reaction
骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome, MDS)是造血系统的一组异质性克隆性疾病,迄今为止其发病机理尚未完全阐明。有研究[1,2]发现,在部分MDS病例中.freelesenchymal stem cells, MSC),又称骨髓基质细胞(marroal cells,MSC),是骨髓造血微环境的重要组成部分[1,2]。近年来,关于MSC与免疫系统的关系、MSC对淋巴细胞增殖反应的影响等已开展了不少研究[3-5],但关于MDS患者的间充质干细胞的免疫调节能力如何,是否与MDS发病相关等的报道尚未见到,我们就此做了有限的研究,报道如下。
材料和方法
研究对象
8例未经治疗的MDS患者的骨髓标本,依照2000年DS患者的MSC对自体淋巴细胞增殖反应的影响
从新鲜肝素抗凝的MDS患者外周血中获得外周血淋巴细胞(PBL)。将1×105 PBL与经60Co照射(总剂量为30 Gy)的等量健康者(第三者)PBL加入96孔板内。在反应的当天加入不同数量MDS患者的MSC,细胞数分别为1×105、3×104、1×104、3×103。每组剂量设置3个复孔,对照孔不含MSC。培养体系为含有10%FBS,2 mmol/L谷氨酰胺和1%青链霉素的RPMI 1640培养液(Gibco公司产品)。共培养5天后, 最后18小时加入1 μ Ci/ersham 公司产品),多头细胞收集器收集细胞,β闪烁仪测定样品cpm值(counts per minute),每组取平均值。以对照孔的平均cpm值为100%最大反应,最大反应百分数=各反应的cpm值/100%反应的cpm值。对照组为获得上述8例健康供者外周血淋巴细胞(PBL)。将1×105 PBL与经60Co照射(总剂量为30 Gy)的等量健康者(第三者)PBL加入96孔板内(n=10),加入上述不同数量级的健康供者MSC,检测其对MLR的影
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