高效液相色谱法测定双参龙胶囊中人参皂苷 Re含量的研究 .docVIP

　　高效液相色谱法测定双参龙胶囊中人参皂苷 Re含量的研究 易延逵，邓虹珠，李跃辉，杨永华 【摘要】 　　目的建立以高效液相色谱法测定双参龙胶囊中人参皂苷 Re含量的方法，改进原含量测定方法。方法色谱柱为supelcosiltmlC18，流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液进行梯度洗脱，检测波长为203 nm ，流速为1.0 ml/min ，柱温为室温，进样量为10 μl 。结果人参皂苷Re进样量在0.45～4.5 μg范围内与峰面积积分值线性关系良好（r＝0.999 1），平均回收率为96.81 %(RSD =1.08%) 。结论 该方法简便、快捷、专属性强、重现性好，克服了原薄层扫描法背景干扰较大、重复性较差等缺陷，可用于双参龙胶囊的质量控制。 【关键词】 高效液相色谱法 双参龙胶囊 人参皂苷 Re 　　Abstract：ObjectiveTo establish an HPLC method for the content determination of gingsenoside Re in Shuangshenlong capsule, improve the original method of TLCS. MethodsHPLC ed on supelcosiltmlC18 column at room temperature，the mobile phase consisted of acetonitrile - 0.1% phosphoric acid solution l / min and sample size 10 μl. ResultsGinsenoside Re ethod is simple，reliable， reproducible, and it improves the shortings of the strong background interference and the bad repetibility ect. It can be used for the quality control of Shuangshenlong capsule. 　　Key adzu　LC 2010高效液相色谱仪，CLASS-VPVER6数据处理软件。PE-λ16紫外分光光度仪；ES-110S电子分析天平（Start Rius，精确到0.001）。 　　1.2 试药 　　双参龙胶囊（购自青海省格拉丹东药业有限公司）；人参皂苷 Re（中国生物制品检定所）；其它试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 色谱条件色谱柱：supelcosiltmlC18 （ 25 mm×4.6 mm，5 μm ）。流动相〔1，2〕：以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸溶液为流动相B，按表1中的规定进行梯度洗脱；检测波长为203 nm；流速1.0 ml/min。理论塔板数按人参皂苷Re峰计算应不低于5 000。 　　2.2 检测波长的选择取人参皂苷Re对照品溶液，照分光光度法〔1〕，在200～500 nm波长范围内进行扫描，结果人参皂苷Re在203 nm波长处有最大吸收，可作为HPLC法测定双参龙胶囊中人参皂苷Re含量的检测波长。紫外扫描图谱见图1。 　　2.3 供试品溶液制备方法的选择〔3,4〕 　　2.3.1 取本品50粒，取内容物，精密称定，研细，取10 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50 ml，称定重量，加热回流1 h，立即冷却，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，用干燥滤纸滤过，弃去初滤液，精密量取续滤液25 ml，蒸干，残渣加水40 ml使溶解。用乙醚振摇提取3次，30 ml/次，弃去乙醚液，水液用水饱和的正丁醇振摇提取4次（30，30，30，20 ml），合并正丁醇液，用1%碳酸氢钠溶液洗涤4次（30，30，30，20 ml），弃去碱液，正丁醇液用正丁醇饱和的水洗涤4次（30，30，30，20 ml），分取正丁醇液，蒸干，残渣用甲醇适量溶解，转移至25 ml具塞瓶中，蒸干，精密加入2ml甲醇使溶解，摇匀，即得。表1 梯度洗脱表（略） 　　2.3.2 取本品50粒，取内容物，精密称定，研细，混匀，取约10 g，精密称定，置索氏提取器中，加乙醚100 ml，加热回流提取1 h，弃去乙醚液。药渣挥去乙醚，置具塞锥形瓶中，精密加入水饱和的正丁醇100 ml，称定重量，加热回流1.5 h，放冷，再称定重量，用水饱和的正丁醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液50 ml，置蒸发皿中，蒸干，残渣加50%甲醇适量使溶解，并转移至10 ml量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 　　实验结果表明，采用方法“2.3.1”项下方法制成的供试品溶液含有较多油脂，进样后杂质峰较多，基线不平