高效液相色谱法测定西司他丁钠的含量及有关物质论文.docVIP

　　高效液相色谱法测定西司他丁钠的含量及有关物质论文 【摘要】 目的 建立HPLC测定西司他丁钠的含量和有关物质。方法 采用高效液相法色谱(HPLC法)，以C18柱(4.6mm×250mm，5μm)为分析柱，乙腈∶0.1mol/L磷酸铵(用磷酸调pH至6.8)(30∶70)为流动相，检测波长210nm，流速0.8ml/min，柱温50℃。结果 西司他丁钠在0.08～0.60mg/ml范围内与峰面积有良好的线性关系，平均回收率为100.2%(n=9)。西司他丁钠与相邻杂质峰完全分离.freelethod for the determination of the content and the related substances of cilastatin sodium. Method The column: C18(4.6mm×250mm, 5μm) obile phase ol/L phosphate ammonium (adjust to pH6.8 , the flol/min and the column temperature n could be pletely separated from other impurities. Limit of detection for cilastatin sodium it of quantitation for cilastatin sodium ethod is reliable, convenient and accurate. The method can be used for determination of content and related substaces of cilastatin sodium. KEY P)的增效剂。IMP单独给药时，经肾小球过滤或分泌后，被近端肾小管上皮细胞刷状缘中的去氢肽酶I水解失活60%～95%，导致尿中活性药物浓度降低。CS能阻抑IMP进入肾小管上皮组织，减少IMP的排泄并保护IMP在肾中不被破坏，可防止因IMP引起的肾小管坏死，减轻药物的肾毒性，增加疗效。两者合用后西司他丁减少IMP被肾小管上皮细胞的去氢肽酶水解，可使IMP的AUC增加20%，在尿中回收的原形药物多达70%，所以在制剂时IMP/CS以等量配制［1］。 IMP/CS适用于多种细菌的混合感染和需氧/厌氧菌的混合感染以及在尚未确定病原菌前的早期治疗，近年广泛用于抗感染治疗，取得满意结果，已成为治疗严重感染的一线药物。 对于原料CS的含量测定，国外药典采用电位滴定法［2］，国内未见报道。本研究建立HPLC法测定CS含量和有关物质，得到满意结果，现报道如下。 1 仪器与试药 岛津LC2010A型高效液相色谱仪，ultiSpec1501紫外分光光度计。 CS原料3批(由某药厂提供；批20044007；CS对照品(纯度97.8%)由河北省药品检验所提供；乙腈为色谱纯，磷酸铵、磷酸二氢钾、盐酸、30%过氧化氢、氢氧化钠均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱：Diamond C18(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈∶0.1mol/L磷酸铵(精密称取磷酸铵20.31mg，加1000ml水使溶解并稀释至刻度，用磷酸调至pH6.8)(30∶70)；流速0.8ml/min；检测波长210nm；柱温50℃；进样量20μl，结果见图1。 1：西司他丁钠； 2、3：未知杂质 图1 西司他丁钠HPLC有关物质图谱 2.2 系统适用性 (1)柱效与不对称度取CS对照品溶液进样，理论塔板数按CS峰计算为7070。 (2)进样精密度试验 取CS对照品溶液连续进样5针，其峰面积的RSD为0.008%，表明系统精密度良好。 2.3 专属性 对CS对照品进行高温、氧化、强酸、强碱的破坏性试验，以研究其降解产物与主峰的分离情况。 在选定的色谱条件下，取上述破坏后供试品溶液进样，结果主峰与各杂质峰获得有效分离，提示氧化和强酸破坏产生较大杂质，高温和强碱破坏总杂质量和杂质个数变化不大，表明CS在氧化、强酸条件下较不大稳定，强碱和高温对样品影响较小。 2.4 准确度 精密称取CS对照品及已知含量的样品各三份，分别置于100ml量瓶中加水溶解并稀释至刻度，制成含量测定浓度的80%、100%和120%的溶液，摇匀，滤过，进样，结果低、中、高3个浓度的回收率(n=3)分别为100.1%(RSD=0.28%)、100.8%(RSD=1.24%)和99.8%(RSD=0.53%)；平均回收率为100.2%(n=9)(表1)，表明方法准确度良好。表1 回收率测定结果 2.5 线性和范围 精密称定CS对照品