高效液相色谱法测定黄金咽喉片中甘草酸的含量论文.docVIP

　　高效液相色谱法测定黄金咽喉片中甘草酸的含量论文 何兵，冯文宇，田吉，李春红，艾洪兵 【摘要】 目的建立黄金咽喉片中甘草酸的含量测定方法。 方法采用HPLC法测定甘草酸的含量。色谱柱为Dikma Kromasil C18柱（5μm，250 mm×4.6 mm）；流动相甲醇0.2 mol/L醋酸铵-冰醋酸（66∶34∶1）；流速0.8 ml·min-1；检测波长252 nm；柱温40℃；进样量10 μl。结果甘草酸在0.4～4 μg范围内具有良好的线性关系（r＝0.999 9），平均回收率为99.65％，RSD为0.514％（n＝6）。实验测得黄金咽喉片中甘草酸的含量为0.978～1.086 mg/片。结论该方法简便、快速、有效、灵敏、准确、具有良好的重复性和回收率.freelethod for the content determination of glycyrrhizic acid in Huangjing Yanhou Tablet．MethodsThe content of glycyrrhizic acid a Kromasil C18 column (5μm，250 mm×4.6 mm) . The mobile phase ethanol-0.2mol/L ammonium acetate-glacialacetic acid（66∶34∶1）. The flol·min-1. The dectetion . The column temperature ple g.ConclusionThis method ple，rapid，efficient，sensitive，accurate and has good repeatability and recovery，it can be used as a quantitative analysis method for this preparation． Key eleon色谱工作站）；瑞士Precisa电子天平（XR 205SM-DR）；CQX25-06超声波清洗器（上海必能信超声有限公司，功率250l，分别超声60 min，照《中国药典》甘草项下甘草酸含量测定方法［1］测定，测得甘草酸含量分别为：0.896，0.987，0.735，1.086 mg/片。甲醇、50％甲醇和水所提取样品其甘草酸含量均低于流动相所提取的样品，故采用流动相制备供试品溶液。 2.1.2 溶剂体积的选择取本品细粉3.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，再分别精密加入流动相25，50，75，100 ml，分别超声60 min，照《中国药典》甘草项下甘草酸含量测定方法测定，测得甘草酸含量分别为：1.028，1.085，1.086，1.086 mg/片。根据测定结果，确定本法提取体积为50 ml。 2.1.3 提取时间的选择取本品细粉0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，再分别精密加入流动相50 ml，分别超声提取15，30，45，60 min，照《中国药典》甘草项下甘草酸含量测定方法测定，测得甘草酸含量分别为：0.845，0.987，1.086，1.085 mg/片。可见本法超声45 min即可。 2.2 色谱条件的选择 2.2.1 检测波长的选择以甘草酸铵对照品、黄金咽喉片样品、阴性对照样品溶液进样，采用二极管阵列检测器在190～380 nm范围内分别扫描其甘草酸的紫外吸收图谱，见图1。对照品和样品中的甘草酸最大吸收峰均在252 nm附近，在此波长下，阴性对照在甘草酸对应峰处无吸收，故检测波长选择252 nm。 2.2.2 色谱柱的选择实验中考察了大连物理化学研究所 Lichrosorb C18（10 μm，200 mm×4.6 mm）、Dikma Kromasil C18 （5 μm，250 mm×4.6 mm）、Dikma Kromasil C18 （5 μm，150 mm×4.6 mm），以Dikma Kromasil C18 （5 μm，250 mm×4.6 mm）色谱柱的分离效果最佳，故选择Dikma Kromasil C18（5 μm，250 mm×4.6 mm）色谱柱。 2.2.3 流动相的选择实验过程中首先考察了2005版《中国药典》Ⅰ部甘草项下测甘草酸含量的条件，即：甲醇∶0.2 mol/L醋酸铵溶液∶冰醋酸（67∶33∶1），但甘草酸峰后有一小峰紧随其后，为达到更好的分离效果，将甲醇比例约降低，改为66∶34∶1，同时升高温度，将甘草酸峰保留时间稍提前，即：流动相为甲醇∶0.2 mol/L醋酸铵溶液∶冰醋酸（66∶34∶1），柱温为40℃，流速为0.8 ml·min-1，在此条件下甘草酸峰与其后面的小峰分离度为4.06，分离效果提高。 2.2.4