大鼠TNF-A ELISA kit说明书.pdfVIP

Rat TNF- α ELISA KIT 目录号 规格 FRK0016 96 Tests FRK0016 48 Tests _________________________________________________________________ (本试剂盒用于体外定量检测大鼠血清、血浆或细胞培养上清液中天然和重组TNF- 浓度，供科 研使用。使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分, 若有任何疑问请与北京嘉美生物技术有限公 司联系，您将得到我们的技术支持。 简介： 早在三四十年代，人们就发现内毒素能引起小鼠移植肿瘤的出血坏死。1975年，Carswell等人 发现卡介苗攻击小鼠后再用内毒素处理，小鼠血清中出现一种能诱导肿瘤组织出血坏死的物质， 故命名为肿瘤坏死因子。TNF还称为恶液素 （cachectin ），这是因为它能引起急性或慢性感染动物 的恶液质状态。TNF- 的生物学活性非常复杂，包括对造血、免疫和炎症的调节；对血管和凝血的 影响和对多种器官（肝、心脏、骨、软骨、肌肉和其它组织）的作用等。TNF- 对不同的细胞有不 同的作用：杀伤细胞，抑制、促进或不影响细胞生长。TNF- 能诱导敏感细胞凋亡。TNF- 能快 速、强烈、不可逆地抑制红细胞系前体 （CFU-ET和BFU-E ）和红系、粒系肿瘤细胞 （K562、 HE2 、HL-60 ）的生长，这种抑制作用不需要淋巴细胞或巨噬细胞的辅助，受抑制细胞必须表达 TNF- 受体。TNF- 能促进人的成纤维细胞增殖，诱导细胞表达EGFR和转铁蛋白受体，胰岛素和 EGF增强TNF- 的这一作用。TNF- 能抑制造血，引起红细胞生成减少、破坏增加。TNF- 也能诱 导T细胞表达MHC- Ⅱ类分子和高亲和力IL-2受体。TNF- 能增加组织因子的表达，抑制抗凝蛋白C 的辅助因子活性，从而引起血管内皮细胞的前凝血活性。TNF- 能促进骨细胞生长和合成DNA ，抑 制碱性磷酸酶活性使骨形成受阻，在骨质吸收和重建中起重要作用。TNF- 能降低骨骼肌胞浆膜的 静息电位，增加细胞内钠离子浓度，使血管内钠离子减少 （称为第三空间性丢失），这种情况在 休克和危象病症中经常出现。TNF- 能抑制脂蛋白脂酶的活性，刺激脂肪溶解增加，抑制几种关键 的脂肪生成酶基因的转录。TNF- 对肝脏、神经内分泌系统、心血管系统、肺脏有复杂的作用。 TNF- 主要通过对肿瘤区域血管的影响引起移植肿瘤的出血坏死。TNF- 的抗肿瘤作用包括TNF- 的直接作用和TNF- 诱导的针对肿瘤的免疫应答。TNF- 能诱导IL-1、IL-6、IL-8、IFN-γ、GM- CSF、TGF-β、NGF和PDGF等细胞因子产生，TGF-β、IL- 10、sTNFR 、CNTF等抑制TNF- 的作 用，而IL-1、IFN-γ、LIF和LPS则增强TNF- 的活性。 检测原理: 实验采用双抗体夹心ELISA法。抗大鼠TNF- 单抗包被于酶标板上，标本和标准品中的TNF- 会 与单抗结合，游离的成分被洗去。加入生物素 化的抗大鼠TNF- 抗体和辣根过氧化物酶标记 的亲合素。生物素与亲合素特异性结合；抗大 鼠TNF- 抗体与结合在单抗上的大鼠TNF- 结 合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加 入显色剂，若反应孔中有TNF- ，辣根过氧化 物酶会使无色的显色剂现蓝色，加终止液变 黄。在450nm处测OD值，TNF- 浓度与OD450值 之间呈正比，可通过绘制标准曲线求出标本中TNF- 浓度。 标本收集: 1. 收集血液的试管应为无热原和内毒素试管。 2. 血浆抗凝剂推荐EDTA。 3. 避免溶血，高血脂标本。 4. 标 应清澈透明，悬浮物应离心去除。 5. 标 收集后若不及时检测，请按一次用量分