大豆种子萌发过程中蛋白质的变化.pdfVIP

盈阻勤缸乩 !塑塑兰匝垂区】k 大豆种子萌发过程中蛋白质的变化 李淑艳I，2王建中1 (t北京林业大学生物学院，北京100083；：孝感学院生命科学技术学院) 摘要：大豆种子富含丰富的蛋白质．为了研究在萌发过程 水后种子的重量，计算种子的相对吸水量、吸水速率和 中蛋白质的变化，本试验对大豆种子吸水的变化、可溶性蛋白 发芽率。试验重复3次。 质含量、蛋白酶活性、肤酶活性、蛋白水解产物(氨基酸和肤含 1．3生化指标的分析在15个垫有2层滤纸的培养 量)含量的变化进行研究。结果表明，大豆种子萌发过程中吸水 皿中分别放置准确称重约109的大豆种子。按照1．2 的变化呈现慢一快一慢的规律．转折点分别是萌发12h和萌发 的方法浸种培养，在相同的时间冷冻干燥后再称重、粉 27ll。虽然种子在萌发期间内的可溶性蛋白、氨态氮及肤含量均 碎、过60目筛，样品装入密封管中贮藏在一25℃冰箱 高于未萌发的大豆种子。但其变化规律不同：可溶性蛋白峰值 出现在9～12h之间．而氨基酸及肤的含量在整个试验过程中始 中。分别取粉碎过筛的豆粉进行脱脂，具体方法为：取 终处于增加的趋势。另外。蛋白酶和肽酶活性在萌发33h之前 39豆粉于试管中，加入3倍体积的丙酮，4℃提取lh， 活性的变化非常小。萌发39—72h时活性急剧加强，萌发72—4000转离心。倾掉上清液，重复脱脂2次，将沉淀风 96h时活性下降。 干．装入密闭的塑料管中并于一25℃贮藏。进行各项生 关键词：大豆；种子萌发；蛋白质；蛋白酶；肽酶 化指标的测定。蛋白质含量测定采用双羧脲法闭。蛋白 酶活性和肽酶活性的测定采用定氮法翻。肽含量的测 蛋白质类型和数量在生物体不同的发育阶段不 定参考鲁伟等【4】的方法。氨基酸含量的测定参考杨贵 同．这些动态变化的蛋白质组构成了细胞某一时刻生 明等嘲的方法。蛋白质电泳方法是将大豆种子在21℃ 命活动的基础．是认识生命活动本质的一个恰当而直 接的途径【l】。在种子萌发过程中关于可溶性蛋白质含 的脱脂材料中提取可溶性蛋白．具体电泳方法详见理 量、蛋向酶活性、肽和氨基酸含量等之间存在着一定的 查德等【q的方法。 相关关系，关于它们之间的具体关系目前研究较少。本 2结果与分析 研究以大豆为材料．通过在种子萌发过程中对蛋白质、 2．1 吸水规律如图l所示．萌发过程中大豆种子 蛋白酶、氨基酸、肽等指标的研究，探讨它们在萌发过 的相对吸水量随着时间的推移而增加．种子萌发 程中的变化规律．为进一步深入研究种子萌发过程中 96h内。吸水过程可以分成3个阶段．第1阶段在 的生理变化提供依据。 0～12h期间，种子的相对吸水量急剧增加，吸水速率 1材料与方法 急剧下降。此过程为物理吸水：第2阶段在12。33h 1．1试验材料大豆种子品系名称056444．购于中国 期间，种子的相对吸水量和吸水速度变化都不大．此 农业科学院。购买后经过筛选和密闭包装，贮藏于 过程为缓慢吸水阶段；第3阶段在27。96h期间。相 一20℃冰箱中。 250 1．2吸水速率的测定试验于2008年4月在北京林 业大学生物学院食品检测与分析实验室内完成。选择 200 饱满、大小均匀、无瑕疵的大豆种子50粒，准确称重。