分子发光分析概要1.ppt

第五章 分子发光分析 定义：激发态分子以辐射跃迁形式释放能量产生分子发光。 分子发光包括光致发光的荧光、磷光和化学发光光谱。 第一节 荧光分析法 一、概述 定性、定量的依据 分析 方法的特点 第一节 荧光分析法 二、基本原理 （一）分子荧光的产生 处于分子基态单重态中的电子对，其自旋方向相反，当其中一个电子被激发时，通常跃迁至第一激发态单重态轨道上，也可能跃迁至能级更高的单重态上。这种跃迁是符合光谱选律的，如果跃迁至第一激发三重态轨道上，则属于禁阻跃迁。单重态与三重态的区别在于电子自旋方向不同。 第一节 荧光分析法 处于激发态的电子，通常以辐射跃迁方式或无辐射跃迁方式再回到基态。 辐射跃迁：荧光、磷光的发射。 无辐射跃迁：振动弛豫（VR）、内转化（ic）、体系间窜跃（isc）等。 第一节 荧光分析法 振动弛豫:指在同一电子能级中，电子由高振动能级转至低振动能级，而将多余的能量以非辐射的形式发出。发生振动弛豫的时间为10-14s—10-12s数量级。 内转化:电子由高能级以无辐射跃迁方式转移至低能级。 系间跨跃：在两个不同多重态之间的无辐射跃迁，如从S1到T1，该跃迁是禁阻的。然而，当不同多重态的两个电子能层有较大重叠时，处于这两个能层上的受激电子的自旋方向发生变化，即可通过自旋-轨道耦合而产生无辐射跃迁。 第一节 荧光分析法 荧光发射 处于第一激发单重态中的电子跃迁至基态各振动能级时，将得到最大波长为λ3的荧光。λ3的波长较激发波长λ1或λ2都长，而且不论电子开始被激发至什么高能级，最终将只发射出波长λ3为的荧光。荧光的产生在10-9-10-6s内完成。 第一节 荧光分析法 （二）荧光效率及其影响因素 1.荧光效率：也叫量子效率，它表示物质发射荧光的能力，通常用下式表示 ? = 发射荧光分子数 / 激发分子总数 ?= kf /（kf+?ki） 式中kf为荧光发射过程的速率常数，?ki为其它有关过程的速率常数的总和。 第一节 荧光分析法 荧光效率越高，物质发射的荧光越强 对于高荧光分子，例如荧光素，其量子产率在某些情况下接近1，说明?kI很小，可以忽略不计。 一般来说，kf主要取决于化学结构，而?ki则主要取决于化学环境，同时也与化学结构有关。 第一节 荧光分析法 2、荧光与分子结构的关系 ?共轭效应：共轭度越大，荧光越强。 ?刚性结构：分子刚性越强，分子振动少，与其它分子碰撞失活的机率下降，荧光量子效率提高。如荧光素（?大）与酚酞（?=0）；芴（?=1）与联苯（? =0.18）。 ?取代基：? 给电子取代基增强荧光（p-?共轭），如-OH、-OR、 -NH2、-CN、NR2等；? 吸电子基降低荧光，如 -COOH、 -C=O、 -NO2、-NO、-X等；? 重原子降低荧光但增强磷光。 第一节 荧光分析法 螯合物中配位体的发光 不少有机化合物虽然具有共轭双键，但由于不是刚性结构，分子处于非同一平面，因而不发生荧光。若这些化合物和金属离子形成螯合物，随着分子的刚性增强，平面结构的增大，常会发生荧光。 如8-羟基喹啉本身有很弱的荧光，但其金属螯合物具有很强的荧光。 第一节 荧光分析法 3 环境因素对荧光的影响 溶剂效应： 溶剂极性增强使物质的荧光波长红移，荧光强度大。 温度：温度增加，荧光强度下降（因为内、外转换增加、粘度 或“刚性”降低）。因此体系降低温度可增加荧光分析灵敏度。 pH值：具酸或碱性基团的有机物质，在不同pH值时，其结构 可能发生变化，因而荧光强度将发生改变。 表面活性剂：荧光物质周围形成胶束，提高荧光效率。 溶解氧：降低荧光效率。 第一节 荧光分析法 （三） 荧光强度与溶液浓度的关系 荧光强度If正比于吸收的光量Ia与荧光量子产率? 。 If = ? Ia 式中?为荧光量子效率，又根据Beer定律，当A0.05 If =2.3 ? I0 klc If = K c 即荧光强度与荧光物质的浓度成之正比，但这种线性关系只有在极稀的溶液中，当?lc?0.05时才成立。对于较浓溶液，由于猝灭现象和自吸收等原因，使荧光强度和浓度不呈线性关系。 第一节 荧光分析法 荧光猝灭: 荧光物质分子与溶剂分子或其它溶质分子的相互作用引起荧光强度降低的现象称为荧光猝灭。 猝灭剂：能引起荧光强度降低的物质称为猝灭剂。 荧光自猝灭效应：自吸收，激发态之间的碰撞 第一节