大肠菌群特异性检测荧光底物MUGal合成与应用.pdfVIP

现代食品科技 Modern Food Science and Technology 2014, Vol.30, No.8 大肠菌群特异性检测荧光底物MUGal的合成及应用 1，2，3 2 2 2 1，2，3 马延霞 ，吴清平 ，张菊梅 ，郭伟鹏 ，韦献虎 （1.中国科学院广州化学研究所，广东广州 510650）（2.广东省微生物研究所，省部共建华南应用微生物国家重 点实验室，广东省菌种保藏与应用重点实验室，广东省微生物应用新技术公共实验室，广东广州 510070） (3.中国科学院大学，北京 100049） 摘要：4- 甲基伞形酮基-β-D-吡喃半乳糖苷（MUGal ）是食品安全中重要指示菌大肠菌群的特异性快速检测荧光底物。本文采用 相转移催化方法使 4- 甲基伞形酮（4-MU ）和四乙酰基-α-D-吡喃溴代半乳糖缩合生成保护的糖苷，再在碳酸钠的水/ 甲醇溶液中去保 护生成 4- 甲基伞形酮基-β-D-吡喃半乳糖苷。通过对温度、时间和催化剂用量对糖苷化一步产率的研究发现，当温度为 30 ℃，反应 时间为 16 h 时，产率最高可达73.12%。醇解反应一步以碳酸钠为碱产率可达91.01%。在对产物进行IR 和 1HNMR 结构表征后，进 一步将产物应用于大肠菌群显色培养基，并和进口底物比较，其产荧光管数经X2 检验无显著性差异（P0.05 ），在实际样品检测中， 采用 GB4789.3-2010 （48 h ）和MUGal 方法（24 h ）的阳性检出率均为80%，MUGal 方法的检出时间明显缩短。因此，本研究制备 的荧光底物能和进口产品相媲美，可以作为进口底物的替代品。 关键词：4- 甲基伞形酮-β-D-吡喃半乳糖苷；相转移催化；大肠菌群；月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST ）  文章篇号：1673-9078(2014)8-251-257  Synthesis and Application of MUGal which is the Specific Fluorescent Substrate for Detection of Coliform   1, 2, 3 2 2 2 1,2,3 MA Yan-xia , WU Qing-ping , ZHANG Ju-mei , GUO Wei-peng , WEI Xian-hu (1.Guangzhou Institute of Chemistry, Chinese Academy of Sciences, Guangzhou 510650, China) (2.Guangdong Institute of Microbiology, State Key Laboratory of Applied Microbiology, South China (The Ministry- Province Jointly Development), Guangdong Provincial Key Laboratory of Microbial Culture Collection and Application, Guangdong Open Laboratory of Applied Microbiology, Guangzhou 510070, China) (3.University of Chinese Academy of Sciences, Beijing 100049, Ch