分析化学 分光光度法.ppt

朗伯—比耳定律 一般光度计的构造 吸光光度法进行定量分析的方法 10.1 物质对光的选择性吸收和光吸收基本定律 一、物质对光的选择性吸收 1.光的基本性质 光是一种电磁波 光具有两象性 电磁波谱范围表 2.物质吸收光的特性 可见光：400-750nm 白光是一种复合光。 同一波长的光称为单色光。 物质颜色和吸收颜色的关系 物质的颜色是因物质对不同波长的光具有选择性吸收作用而产生，物质的颜色与吸收光的颜色互为互补色。 互补色光：可以合成白光的两种对应颜色的光称为互补色光。将它们按一定比例混合，可得到白光。 溶液的光吸收曲线 最大吸收波长 ?max KMnO4溶液的?max=525nm 物质颜色和吸收颜色的关系 ※二、光吸收的基本定律—朗伯比耳定律 入射光为平行单色光 1.朗伯—比耳定律 2.吸光系数、摩尔吸光系数与桑德尔灵敏度 ① 吸光系数 a A=Kbc A = abc c - g.L-1; b-cm; a 称为吸光系数 ②摩尔吸光系数? A = ? b c c -mol.L-1; b-cm; ? 称为摩尔吸光系数 ③桑德尔灵敏度 S 桑德尔灵敏度 S就是规定仪器的检测极限为 A = 0.001时，单位截面积光程所能检测出来的吸光物质的最低含量，以 μg.cm-2 表示。S与? 的关系如下： 例1.已知含Cd 2+浓度为140?g.L-1 的溶液，用双硫腙法测定镉，液层厚度为2cm, 在?max=520nm处测定的吸光度为0.22，计算摩尔吸光系数?及桑德尔灵敏度S。 ※ 10.2.分光光度计及吸收光谱 分光光度计的主要部件 a．光源 （钨灯、氢灯）通常用6～12 V钨丝灯作可 见光区的光源，发出的连续光谱在360—800nm范围内。光源应该稳定，即要求电源电压保持稳定。为此，通常在仪器内同时配有电源稳压器。 b．单色器 单色器的作用是将光源发出的连续光谱分解为单色光的装置。分为棱镜和光栅。 棱镜：依据不同波长光通过棱镜时折射率不同分光 棱镜是根据光的折射原理而将复合光色散为不同波长的单色光，然后再让所需波长的光通过一个很窄的狭缝照射到吸收池上。它由玻璃或石英制成。玻璃棱镜用于可见光范围，石英棱镜则在紫外和可见光范围均可使用。 光栅：在镀铝的玻璃表面刻有数量很大的等宽度等间距条痕(600、1200、2400条/mm )。 光栅是根据光的衍射和干涉原理将复合光色散为不同波长的单色光，然后再让所需波长的光通过狭缝照射到吸收池上。它的分辨率比棱镜大，可用的波长范围也较宽。 c．比色皿 也称吸收池。 用于盛放试液的容器。它是由无色透明、耐腐蚀、化学性质相同、厚度相等的玻璃制成的，按其厚度分为0.5 cm，1 cm，2 cm，3 cm和5 cm。在可见光区测量吸光度时使用玻璃吸收池，紫外区则使用石英吸收池。使用比色皿时应注意保持清洁、透明，避免磨损透光面。 d．检测器 检测器的作用是接受从比色皿发出的透射光并转换成电信号进行测量。分为光电管和光电倍增管。 光电管是一个真空或充有少量惰性气体的二极管。阴极是金属做成的半圆筒，内侧涂有光敏物质，阳极为一金属丝。光电管依其对光敏感的波长范围不同分为红敏和紫敏两种。红敏光电管是在阴极表面涂银和氧化铯，适用波长范围为625—1 000nm；紫敏光电管是阴极表面涂锑和铯，适用波长范围为200—625nm。 光电倍增管是由光电管改进而成的，管中有若干个称为倍增极的附加电极。因此，可使光激发的电流得以放大，一个光子约产生106～107个电子。它的灵敏度比光电管高200多倍。适用波长范围为160～700 nm。光电倍增管在现代的分光光度计中被广泛采用。 e．显示装置 显示装置的作用是把放大的信号以吸光度A或透光率T的方式显示或记录下来。分光光度计常用的显示装置是检流计、微安表、数字显示记录仪。 二、分子吸收光谱----可见光吸收光谱 二、分子吸收光谱----可见光吸收光谱 三、吸光度的测量 选择物质最大吸收波长，选择合适的参比溶液，用来调节仪器零点，消除洗手池及溶剂的影响，消除干扰。 参比溶液选择原则： 试液与显色剂均无色时，可用蒸馏水作参比； 显色剂无色，被测试液存在其它有色离子，可用不加显色剂的被测试液为参比； 显色剂有色，可不加试样的试剂空白为参比； 显色剂和被测离子均有色，可加掩蔽剂掩蔽被测试液为参比。 10.3 显色反应