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实验室猪精液品质检测新技术 - 种猪信息网—种
精子密度检测 估 测 法 精子密度仪法 和CASA 法 血细胞计数法 主观性强,误差大 <一个精子为“密” =一个精子为“中” >一个精子为“稀” 最准确,但速度慢 滴上1滴稀释精液 原精液200μL 3%NaCl稀释10倍 计数板上放盖玻片 计数5个中方格精子 将该数乘以50万 方便、时间短、重复性好 猪精子密度一般为2~3亿/ml 生产上主要以精子密度仪法检测 精子畸形率检测 取中层精液抹片 固定液固定20min Giemsa染色90min 水洗并风干 置1000倍油镜下 观察精子> 300个 畸形率检查方法 相差显微镜直接观察 伊红或姬姆萨等染色后普通显微镜观察 畸形率要求 染色后显微镜观查 影响:畸形率过高会减少精液的受精能力 要求:一般要求不超过18%为宜 改善:增加精液的用量可以提高其受精效果 精子质膜完整性检测 精子质膜染料分类 精子不同区域质膜的检测 目前主要的精子质膜检测方法 精子质膜作用及分布 1 2 3 4 精子质膜作用及分布 维持完整的 细胞内环境 受精过程中起到信 号识别与传导作用 转运物质功能 覆盖于顶体外 膜区上的质膜 覆盖于精子头部 非顶体区的质膜 覆盖于尾部的中段 和主段部分的质膜 作用 分布 精子 质膜 染色原理:此种染料不能进入质膜完整功能的精子内部,只能进入质膜受损的精子,并与DNA结合发出荧光。 染色原理:活精子特异的
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