猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较概要1.doc

猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较 试验方案 猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较 参考编号 试验的日期 动物试验 开始日期 2014- - 动物试验 完成日期 2014-- 实验室试验 开始日期 2014-- 实验室试验 完成日期 2014-- 动物试验 地点 实验室试验地点 江苏省农科院兽医所 试验负责人 邵国青 动物试验 负责人 冯志新、熊祺琰、华利忠 动物试验参与者 甘源、王佳、徐飞扬、陈财 实验室试验 负责人 冯志新、熊祺琰、华利忠 实验室实验参与者： 冯志新、熊祺琰、马庆红、陈财、王佳 试验方案起草人 冯志新、熊祺琰、华利忠 试验方案讨论参加者 邵国青、刘茂军、冯志新、熊祺琰 试验方案定稿人及时间 2014- 记录的附件页数 目录 猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较 1 猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较 1 目录 2 猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较 3 1 目的 3 2 材料与方法 3 2.1 材料 3 2.2方法 4 2.2.1动物分组说明 4 2.2.2动物分组与试验操作概表 5 2.2.3免疫 6 2.2.4 疫苗免疫后临床症状观察记录 7 2.2.5 疫苗免疫后血清抗体及分型检测 7 2.2.6 疫苗免疫后细胞免疫指标检测 7 2.2.7 疫苗免疫后黏膜免疫指标检测 7 2.2.8攻毒 7 附录1 攻毒保护率计算 9 附录2 猪支原体肺炎发病猪临床症状评判标准 10 附录3 动物分组记录表 11 附录4 动物免疫记录表 12 附录5免疫后异常临床症状观察记录表 13 附录6 抗体检测记录表 14 附录7 淋巴细胞增殖试验结果 16 附录8 血象分析 17 附录9 T淋巴细胞分类计数 18 附录10 黏膜抗体检测记录表 19 附录11攻毒记录单 20 附录12特殊情况记录表 21 附录13 攻毒后临床症状观察记录表 22 附录14日增重记录 24 附录15 攻毒后肺部剖检记录 26 附录16攻毒后剖检记录 28 附录17 攻毒后肺部病理损伤记录 30 附录18 攻毒后肺部猪肺炎支原体抗原定量检测 32 猪支原体肺炎疫苗多菌株免疫效果比较 1 目的 猪支原体肺炎活疫苗AN306菌株与原168菌株的肺内注射免疫效果比较； 猪支原体肺炎疫苗（天邦、吉林正业、辉瑞）免疫效果比较； 2 材料与方法 2.1 材料 2.1.1待试的疫苗产品与试剂 2.1.1.1 疫苗 A.猪支原体肺炎活疫苗AN306株F321，由江苏省农业科学院兽医所研制，规格为2×107CCU/瓶（2ml冻干），批号有效期：______。PCR鉴定:Mhp_____，Mhr_______。 B.猪支原体肺炎活疫苗（168株），由南京天邦生物科技有限公司提供，规格为50头份/瓶，批号为139078-1。有效期：______。PCR鉴定:Mhp_____，Mhr_______。 C.猪支原体肺炎活疫苗（乳兔继代株），由吉林正业生物科技有限公司提供，规格为 4头份/瓶，批号为2014002。有效期：_ D.猪支原体肺炎灭活疫苗（P-5722-3株，Suvaxyn RespiFend MH），由上海硕腾（辉瑞）提供，规格为50头份/瓶，批号为1302777A。有效期：15/11/16_ 2.1.1.2 试剂 A．猪支原体肺炎活疫苗（乳兔继代株）稀释液,批号：2014002；有效期B．猪支原体肺炎雾化活疫苗稀释液 C．猪支原体肺炎肌注活疫苗佐剂G-1-1 2.1.2动物 选择猪肺炎支原体抗体、抗原均阴性的5-10日龄仔猪，54头. 饲养地点：江苏省农科院兽医所 饲养员：_徐飞扬，陈才__ 仔猪免疫状况：未打气喘病疫苗。 2.1.3 动物饲料 仔猪料: 2.1.4 设备 气雾免疫设备、滴鼻头、20（10、5、2）ml注射器、耳标、耳号钳、冰盒、相机、解剖器械、离心管。 2.1.5攻毒用强毒 猪肺炎支原体强毒JS株组织强毒，来自本所，批-20℃保存，有效期至：2014/06/25。 2.2方法 2.2.1动物分组说明 G1:-猪支原体肺炎活疫苗168株肺内免疫组。 每头猪肺内注射免疫1头份（1ml）即1×107 CCU的猪支原体肺炎活疫苗168株。免疫一次，一免后6周攻毒，攻毒后28天剖杀。 G2: -猪支原体肺炎活疫苗AN306株肺内免疫组。 每头猪肺内注射免疫1ml，即1×107CCU的猪支原体肺炎活疫苗AN306株。免疫一次，6周后攻毒，攻毒后28天剖杀。 G3: -猪支原体肺炎活疫苗168株气雾免疫组。 每头猪气雾免疫5×107CCU的猪支原体肺炎活疫苗168株。免疫一次，6周后攻毒，攻毒后28天剖杀。 G4:-猪支