证实小鼠动情周期子宫腔液中14-3-3zetaand14-3.PDFVIP

立 論 14-3-3 zeta and 14-3-3 epsilon Identification of the 14-3-3 zeta and epsilon isoforms in mouse estrous uterine fluid 老 李 年 Identification of the 14-3-3 zeta and epsilon isoforms in mouse estrous uterine fluid 作者 ：田莉雪 國立台東大學 生命科學系所 摘 要 在小鼠的動情週期時 ，子宮內膜細胞在動情前期時增生相當 明顯 ，而動情期時會顯著性的死亡 。從死去的子宮內膜細胞 所釋放的某些蛋白不僅有助於充當監測其死亡的生物指 標 ，或許可以經由這些蛋白的足跡 ，拼湊出子宮內膜死亡的 輪廓 。而這些釋出的蛋白最有可能會存於子宮腔液中 。因此 我們透過研究動情期與動情前期腔液中明顯差異的蛋白 ，作 為尋找這些指標蛋白的方法 。利用 SDS比較兩個不同 時期子宮腔液的蛋白形態 ，進而找到一個約 30 kDa的蛋白 ， 具有動情期腔液內之含量顯著大於動情前期的特性 。將此蛋 白帶 （protein band ）切開 ，並以胰蛋白酶作用 ，再利用 LC/MS/MS 分析。經由 Peptides 片段的分析 證實內含， 14-3-3 i epsilon 與 14-3-3 zeta 。免疫分析的結果證實 14-3-3 zeta 在動情期腔液內之含量遠大於動情前期 。將動情期的子宮腔 液以分子篩 Sepharcyl S-200 進行分離後 ，經由決定收集管 中 14-3-3 zeta 與 14-3-3 epsilon的分佈形態並比對 ，得 知它們呈現 dimer form 形式但卻無同收集管 (Co-fractionation)之特性 。而且 14-3-3 epsilon 並無法 與 14-3-3 zeta 抗體產生共同沈殿作用 。總之 、這個研究認 定 ，透過動情期腔液中 14-3-3 zeta量的分析 ，可以充當小 鼠子宮內膜破壞的生物指標 (biomarker) 。 關鍵字 ：endometrial damage 、14-3-3 epsilon 、14-3-3 zeta 、 LC/MC/MS 、生物指標 ii Identification of the 14-3-3 zeta and epsilon isoforms in mouse estrous uterine fluid Li-Hsueh Tien Abstract During the mouse estrous cycle, the endometrium prominently proliferates in proestrus and dramatically degenerates in estrus.