减肥类中成药或保健食品中酚酞、西布曲明及其衍生物检测方法.PDF

减肥类中成药或保健食品中酚酞、西布曲明及其衍生物检测方法 减肥减肥类中成药类中成药或保健或保健食品中食品中酚酞酚酞、西布曲明、西布曲明 减肥减肥类类中成药中成药或保健或保健食食品中品中酚酞酚酞、、西布曲明西布曲明 及其及其衍生衍生物检测物检测方法方法 及其及其衍生衍生物物检测检测方法方法 本 方 法 适 用 于 减 肥 类 中 成 药 或 保 健 食 品 中 非 法 添 加 酚 酞 (Phenolphthalein)、西布曲明 （Sibutratmine）及其2 种衍生物 N,N-双去甲基 西 布 曲 明 (N,N-Didesmethylsibutramine) 、 N- 单 去 甲 基 西 布 曲 明 (N-Monodesmethylsibutramine)的筛查验证。 该方法中，高效液相色谱法用于定性检查；经定性检查结果为阳性的样品， 需经液-质联用方法验证后出具检验报告。 【检查检查 】 非法添加酚酞、西布曲明、N,N-双去甲基西布曲明、N-单去甲基 检查检查 西布曲明 一、一、高效液相色谱高效液相色谱法 法 照高效液相色谱法（中国药典2010 年版一部附录ⅥD） 一一、、高效液相色谱高效液相色谱法法 测定。 色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 ；以 色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验 0.02mol/L 乙酸铵溶液 （用乙酸调节pH 至 4.0）-乙腈 （56:44）为流动相，流速： 0.7ml/min；柱温：35℃；二极管阵列检测器，检测波长为 225nm 及 200～400nm 光谱扫描。理论板数按各对照品峰计算，应不低于 3000。 对照品溶液的制备对照品溶液的制备 取酚酞、西布曲明、N,N-双去甲基西布曲明、N-单去甲 对照品溶液的制备对照品溶液的制备 基西布曲明对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1ml 各含 0.1mg 的混合溶液， 即得。 供试品溶液的制备供试品溶液的制备 称取供试样品约 1g（固体制剂研细），加甲醇 25ml，超 供试品溶液的制备供试品溶液的制备 声处理 5 分钟，滤过，即得。 测定法测定法 分别精密吸取混合对照品溶液、供试品溶液各 10μl，注入液相色 测定法测定法 谱仪，测定，记录液相色谱图和紫外光谱图，并进行比较。 结果判结果判断 供试品色谱中断 ，应不得检出与各对照品色谱峰保留时间一致的色 结果判结果判断断 谱峰；若出现保留时间一致的色谱峰，采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰的 紫外-可见吸收光谱，应不相同。 第 1 页 共 4 页 减肥类中成药或保健食品中酚酞、西布曲明及其衍生物检测方法 二、二、液相色谱液相色谱-质谱联用-质谱联用法 法 二二、、液相色谱液相色谱--质谱联用质谱联用法法 色谱条色谱条件 件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以 0.02mol/L 乙酸铵溶液 色谱条色谱条件件 （用乙酸调节pH 至 4.0）-乙腈 （60:40）为流动相；检测波长 225nm。 -1 质谱质谱条件条件 电喷雾离 子化源(ESI)，毛细管电压 3.5kV，脱溶剂气 500 L·h ， 质质谱谱条件条件 -1 锥孔反吹气 50L·h ，正离子检测方式，扫描方式为全扫描一级质谱、全扫描二 级质谱，扫描范围 50～600amu。 对照品溶液的制备对照品溶液的制备 取酚酞 、西布曲明、N,N-双去甲基西布曲明、N-单去甲 对照品溶液的制备对照品溶液的制备 基西布曲明对照品适量，精密称定，加甲醇制成每 1ml 各含 0.02mg 的混合溶液， 即得。 供试供试品溶液的制备品溶液的制