实验二十二运动性疲劳生化判断.pptVIP

实验二十二 运动性疲劳的生化判断 1 实验目的与要求 1.实验目的与要求 ⑴目的 ①通过实验使学生掌握运动性蛋白尿及尿糖的测定方法及该二项指标在运动实践中的应用和意义，为体育教学和运动训练提供指导。 ②学习掌握尿蛋白磺基水杨酸比浊法、尿中葡萄糖邻甲苯胺法检测的实验原理。 ③进一步巩固离心机、分析天平、分光光度计等仪器的基本操作。 ④通过研究设计型实验的实验设计与研究过程，提高学生的学习兴趣，培养学生查阅文献资料、独立思考、创新思维、动手操作、分析问题和解决问题的能力，使学生基本掌握从事一般科学研究的方法。 ⑵ 要求 ① 4-5人一组，自由组合编组，选定一人担任小组长。 ② 查找国内外近十年有关运动训练中尿蛋白及尿糖变化的文献资料并总结，以小组为单位进行讨论，拟定实验的内容与指标。 ③ 根据拟定的实验内容与指标，讨论拟定运动实验对象的训练方案：运动方式、运动强度与时间等（包括学会训练实验动物）。 ④ 掌握实验对象取材、标本处理的方法与尿蛋白磺基水杨酸比浊法、尿中葡萄糖邻甲苯胺法的操作方法。 ⑤ 详细制定实验步骤与方法，严格按照实验步骤与要求进行实验。 2 实验仪器与试剂⑴实验仪器 ⑴实验仪器 ①尿蛋白磺基水杨酸比浊法：试管、可见光分光光度计等 ②尿中葡萄糖邻甲苯胺法：试管、水浴锅、烧杯、可见光分光光度计等 ⑵ 试剂 ⑵ 试剂 ①尿蛋白磺基水杨酸比浊法：3%磺基水杨酸溶液：称取A.R纯品磺基水杨酸3.0g和无水硫酸钠7.0g，以蒸馏水溶解至100ml，必要时过滤备用。 ②尿中葡萄糖邻甲苯胺法： 邻甲苯胺的处理：邻甲苯胺显红棕色，则应重蒸馏，收集199-201℃的馏出物，馏出液微带黄色。蒸馏时弃去首尾部分。向蒸馏所得之邻甲苯胺中按每500ml加入0.5g盐酸羟胺，置56℃水浴中加温，不断振摇，使其溶解，置棕色瓶中塞贮冰箱中备用。 O-TB试剂（邻甲苯胺显色剂）：在清洁的1000 ml容量瓶中，加入硫脲1.5g，加冰醋酸约400-500 ml使其溶解，溶解后加入60 ml经上述处理的邻甲苯胺，再加饱和硼酸溶液40 ml，然后用冰箱醋酸加至1000 ml刻度，摇匀，贮于棕色瓶中。 饱和硼酸溶液称取硼酸6g，加蒸馏水至100 ml，置室温数日，取上清液应用。 葡萄糖标准贮备液（10mg/1ml）取无水纯葡萄糖（A.R）2-3克，置于洁净的烧杯内，在40-50℃干燥箱中烘干至恒重，置于干燥器中保存。准确称取烘干的葡萄糖1.000g，加约50 ml 0.25%安息香酸溶液溶解，倒入100 ml容量瓶中，用0.25%安息香酸溶液稀释至刻度，置冰箱中保存。 葡萄糖标准应用液（1ml含1 mg）将葡萄糖标准贮备液用0.25%安息香酸溶液稀释10倍即成。 0.25%安息香酸溶液：称取安息香酸2.5g，加蒸馏水使溶解后，倒入1000 ml容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度。 3 实验内容 3 实验内容 ⑴设计本次实验方案 ①实验对象的选择（不同项目运动员）运动训练方式、强度、持续时间及取样时间的选择。 ②尿糖及尿蛋白的实验测定方法选择，尿蛋白采用磺基水杨酸比浊法、尿糖采用邻甲苯胺法进行检测。 ③确定实验数据的统计学处理方法 ⑵在教师的指导下准备仪器药品并进行实验 ⑶对实验结果进行分析与讨论，写出实验报告或小论文。 4 实验原理与应用 4 实验原理与应用 尿液是经肾小球滤过，通过肾小管和集合管的重吸收及排泄产生的终末产物，因此尿液的组成和性状可直接反映机体的代谢状况，在运动性疲劳的状态下，尿液的组成和性状可发生变化，故运动医学上常常通过尿液的检验来评定运动员的运动负荷强度和量度、机能状态等等。 正常人终尿中的蛋白质含量极少，24 h尿中排出的总量约为20-80 mg，平均40 mg，一般定性实验为阴性。当尿内蛋白增多，用常规定性方法检查为阳性或定量检查超过每24小时150 mg时称为蛋白尿。 运动员的尿蛋白含量与正常人含量无差别。由于运动而使尿中蛋白质量增多的现象称为运动性蛋白尿。运动后尿蛋白可以作为评定运动员运动负荷强度和量度、身体机能状态及对训练负荷适应情况的指标。运动性蛋白尿在运动后能迅速地自行复原，不同于病理性蛋白尿。 在评定运动负荷时，运动强度越大，尿蛋白生成量越多。在运动实践中应用尿蛋白指标，也可以评定运动后的恢复情况。评定恢复状态时有以下情况：①运动后4 h或次日晨恢复到正常植，说明机能恢复。②次日晨还处于较高水平，说明机能未恢复。总之，通过测定运动后尿蛋白的排泄量，可以用来评定运动量，特别是运动强度和运动员机能状态，为训练课的负荷调整，掌握运动员机能状态提供参考。 5 实验参考方案 5 实验参考方案 ⑴实验对象：实验对象为运动人体科学专业学生10名，采用功率自行车进行大强度运动训练建立运动实验模型。 ⑵运动训练方案：运动模型的建模