目的基因与载体的连接.pptVIP

杆状病毒表达系统利用一种不依赖于辅助病毒的病毒,该病毒可在适于悬浮培养的昆虫细胞中增殖至高滴度,能获得大量的重组蛋白,大部分超量表达的蛋白质为可溶性蛋白.杆状病毒对脊椎动物无感染性。 第五节 基因的改造 (一 )寡核苷酸介导的定点诱变法的建立 （二）含U模板法 （三）PCR定点诱变法 寡核苷酸介导的 诱变方法的基本原理： 含U模板法 PCR介导的 定点诱变法 第六节 克隆基因的表达 ? 基因工程的主要目的之一，就是要制备大量有用的蛋白质和多肽，尤其是人体蛋白。得到了克隆的基因或cDNA后，按照正确的方向插入表达载体，连在启动子的后面，导入相应的宿主细胞，即可进行表达。在不同的表达系统中，其表达方式不尽相同。 真核生物结构基因示意图 真核生物基因的结构特点 原核生物基因的结构特点 基因是连续的, 无内含子 一、大肠杆菌表达系统 大肠杆菌表达外源基因的优势 繁殖迅速 培养简单 操作方便 遗传稳定 大肠杆菌表达外源基因的劣势 1.缺乏对真核生物蛋白质的修饰加工系统 如糖基化或磷酸化等修饰作用 2. 内源性蛋白酶降解空间构象不正确的异源蛋白, 造成表达产物不稳定 （一）基因表