第七章紫外-可见分光光度法2案例.ppt

第六节 紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介 7．利用分光光度法测定血清中镁的含量。取浓度为10.0mmol/L的镁标准溶液10.0?l置于容量瓶中，加3.00ml显色剂进行显色后，稀释至刻线，摇匀，测得吸光度为0.32；另取待测血清50.0?l置于另一相同规格的容量瓶中，加3.00ml显色剂进行显色后，稀释至刻线，摇匀，在相同条件下测得吸光度为0.47，试计算血清中镁的含量。 第六节 紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介 8．有两种化合物A、B的混合溶液，已知化合物A在282nm和238nm波长处的比吸光系数分别为720 g·100ml-1和270g·100ml-1；而化合物B在上述两波长处的吸光度相等。现把化合物A、B的混合溶液盛于1cm的吸收池中，测得282nm波长处的吸光度为0.442，238nm波长处的吸光度为0.278，试求混合溶液中化合物A的浓度。 本章结束！ 谢谢! 第五节 定性定量方法 2.等吸收波长消去法（双波长分光光度法） 当试样中两个待测组分的相互干扰比较严重时，用解联立方程组的方法进行定量分析会产生较大的误差，这时可以用等吸收波长消去法进行测定。 在试样中含有两个待测组分a和b时，若要测定组分b，组分a有干扰，应设法消除组分a的吸收干扰。首先选择待测组分b的最大吸收波长λ2作为测量波长，然后用作图的方法选择参比波长λ1，使组分a在这两个波长处的吸光度相等。 第五节 定性定量方法 试样溶液在λ2和λ1两个波长处的吸光度之差，只与待测组分b（ a）的浓度成正比，而与干扰组分的浓度无关。 3.差示分光光度法 当待测组分含量过高时，吸光度超出了准确测量的读数范围，可以采用差示分光光度法。具体方法是用一个比试样溶液浓度稍低的标准溶液作为参比溶液，将分光光度计调零（透光率100%），测得的吸光度就是被测试样溶液试液与参比溶液的吸光度差值（相对吸光度）。根据光的吸收定律得： △A＝Ax－As＝ΕL(cx－cs) 即：待测溶液与参比溶液的吸光度差值与两溶液的浓度之差成正比。 第五节 定性定量方法 第五节 定性定量方法 课堂活动 1.在紫外-可见分光光度法中，影响吸光系数的因素是 A．溶剂的种类和性质 B．溶液的物质量浓度 C．物质的本性和光的波长 D．吸收池大小 E．待测物的分子结构 2.紫外-可见分光光度法常用的定量分析方法有 A．间接滴定法 B．标准对比法 C．标准曲线法 D．直接电位法 E．吸光系数法 第五节 定性定量方法 课堂互动 3．在符合朗伯-比尔定律的条件下，有色物质的浓度、最大吸收波长、吸光度三者的关系是 A．增加、增加、增加 B．增加、减小、不变 C．减小、增加、减小 D．减小、不变、减小 4．维生素D2的摩尔吸收系数?264nm=18200。用2.0cm吸收池测定，如果要控制吸光度A在0.699～0.187范围内，应使维生素D2溶液的浓度在什么范围内？ 第五节 定性定量方法 点滴积累（1） 紫外-可见分光光度法的各种定量方法的优缺点： 1．标准曲线法的优点：测定大批量样品时，操作简单、准确、快速。缺点：不同人处理相同的测量数据，得到的结果不易完全相同。 2．标准对比法的优点：测量数据相同，任何人都能得到完全一致的结果。缺点：随机误差较大。 3．吸光系数法的优点：与标准对比法的优点相同。 缺点：测定条件不易与文献完全一致，从而引入误差。 第五节 定性定量方法 点滴积累（2） 紫外-可见分光光度法的各种定量方法的优缺点： 4．解联立方程组法的优点：可以不经分离直接测定二元组分溶液。缺点：在两个测定波长处，要求两个组分的吸光系数有较大的差别。 5．等吸收波长消去法的优点：可以不经分离直接测定二元组分溶液，还适于测定混浊液的测定。缺点：要求干扰组分的吸收光谱中有一个峰或谷。 6．差示分光光度法的优点：可以直接测定高浓度溶液。缺点：需要用高精密度的仪器。 第六节 紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介 一、有机化合物的紫外-可见吸收光谱 有机化合物的紫外-可见吸收光谱主要是由分子中价电子的能级跃迁而产生的。 电子的能级跃迁有4个基本类型。 第六节 紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介 二、根据紫外-可见吸收光谱推断官能团 三、根据紫外-可见吸收光谱推断异构体 （一）判别顺反异构体 （二）测定某些化合物的互变异构现象 第六节 紫外-可见吸收光谱在有机化合物结构分析中的应用简介 点滴积累 1．紫外-可见吸收光谱是化合物的