生物测定技术资料.ppt

（1）选择饱满度一致的小麦种子，浸种2h后，排列在铺有滤纸或纱布的搪瓷盘中，在室温20℃左右进行催芽，3~4d后苗高达2~3cm。 (2)精选高度一致的幼苗，轻轻取出；免得伤害根部，然后用镊子摘除胚乳，再用水漂洗掉附在上面的胚乳成分，准备种植。 去胚乳小麦幼苗法 （3）在直径4.5cm高5.0cm的小玻璃杯注入不同浓度的供试药液3ml和稀释10倍的培养液6ml，每杯播入上述去胚乳小麦幼苗10株。 （4）在温度21~26℃左右和光照下培养6~7d后观察药效。注意每天应该给每个小杯称重，补足损失的水分。 1　　　2　　　3　　　4　　　5　　　CK 测量所有小麦苗的生长量，即从芽鞘到最长叶尖的距离，并按下式求出生长抑制率，继而求出EC50 　 　　　　　　　　　对照生长量一处理生长量 生长抑制率（％）＝－－－－－－－－－－－X 100 　　　　　　　　　　　　对照生长量 结果检查与计算 本法是由南开大学元素所谭惠芳等建立的。对测定触杀型除草剂较敏感，如百草枯、杀草快、除草醚、敌稗等。另外，对通过干扰体内含氮化合物代谢而杀草的除草剂也很敏感，如杀草强、杀草胺， 2，4－D， 2，4，5－T、二氯丁酸等。 6.萝卜子叶法 将洗净的水萝卜种子播种在垫有二层滤纸的大培养皿内，加入适量蒸馏水，加盖后置27℃恒温箱黑暗培养约30h后，从幼苗上切下子叶，选择大小一致的10片放于垫有一层滤纸的培养皿内（皿直径5cm），皿内盛有2mm磷酸缓冲液配制的一系列不同浓度除草剂溶液5ml，加盖置于25土l℃的恒温室内培养，给予2000—3000lx萤光灯连续光照3d后，称子叶鲜重，求出抑制叶片生长50％的除草剂浓度，也可测定叶绿素的含量。 　该法是由沈阳化工研究院建立的，适用于脲类及均三氮苯类光合作用抑制剂的生物测定方法。对绿麦隆、利谷隆的敏感度可达0.025ppm。 7.番茄水培法 首先用盆栽法培养番茄苗，待二片真叶时，作水培试材用。取30ml试管编号。将供试药剂用培养液稀释成一系列浓度的溶液，每只试管加入10ml。挑选生长健壮，大小高度一致的番茄苗，将主根及子叶剪掉后插入试管，每管插苗4株（播前称重，使各管苗重相等）。在光照下25℃培养2周左右（反应速度与光照及温度有关），测定苗的鲜重。培养期间应每天补加蒸发掉的水分。以生长抑制率来评价活性，亦可求出EC50。 和番茄水培法相似的还有燕麦法　将土壤和供试药剂混合，在大玻璃管内装入200g土壤（以干土计），播入挑选的燕麦种子，土壤水分保持在50％左右，自然光下培养2周后，测量地上部分的鲜重。 菜豆叶片法　土壤内混入一定量药剂，然后播入菜豆种子，土壤含水量60％左右，自然光下培养，当第一片三重复叶长全，第二片又刚刚出现时，测量其叶面积。 　 Taylor和Loader，1984年建立了该种方法，目的是筛选防治野燕麦的除草剂混剂，该法快速、简便。 8.叶鞘滴注法 具体方法是：当正常生长的燕麦长至1个半叶（即1叶1心）时，在第一片叶张开的叶鞘里，滴加10ul供试的一定浓度的药液。24-28h后，切下根，取上部约2cm长的一段，插入清水洋菜培养基上。再经24h，取出测量每一剂量处理的叶片延伸长度，并以此评判除草剂活性。 　　本法是Suwunnamek设计的，用来测定内吸传导性且作用缓慢的除草剂，如草甘膦等。该法既可反应药剂的传导性能，又能反映药剂对地下部分再生能力的抑制程度。 9.再生苗测重法 用盆栽法种植香附子，等长成苗后，叶面喷洒一定浓度的草甘膦药液，一周后剪除香附子苗（离土表1cm），再经过一个月左右测再生苗的的鲜重。 沈阳化工研究院改进了此方法，利用玉米做试材。具体方法：将6粒已催芽的玉米种子种在花盆内，在3叶期时喷施草甘膦，24h 后，从第一片玉米叶基部剪去顶端。经一定时间后，测量再生苗的鲜重或高度。 也可在喷药后不同时期剪去苗的地上部，测其是否再生或再生后地上部分的鲜重。 五、除草剂田间药效试验 　　调查除草剂效果或调查除草剂增产情况都要坚持随机取样，随机取样的方法有五点法，对角线法、棋盘式取样法等。 　生育期施用除草剂，应在施药前1～3天先调查一次杂草基数，作物播前或播后苗前施用除草剂则不进行用药前的杂草基数调查。施药后调查除草效果应根据除草剂的作用快慢决定调查时间，还要根据除草剂持效长短作第二次甚至第三次调查，每两次调查之间相隔7～15天。 　调查点的数量应由小区面积决定，小区试验一般每小区取3～5点调查，示范性试验每区调查点应在5个以上。多次调查时；可以采用定点调查法或不定点调查法。应注意，如果第一次调查时将杂草