DB33 400.1-2003 无公害食品 竹荪 第1部分：菌种.pdfVIP

DB33 400.1－2003 公害食品 竹荪 第 1 部分：菌种 1 范围 本部分规定了竹荪的母种、原种、栽培种的要求，试验方法、检验规则、标志、包 装、运输、储存。 本部分适用于长裙竹荪菌种生产和销售。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本部分的引用而成为 部分的条款。凡是注日期的引用文件， 其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据 部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版 。凡是不注日期的引用文件， 其最新版本适用于本部分。 GB/T 191－2000 包装储运图示标志 GB/T 6388－1986 运输包装收发货标志 GB/T 12728－1991 食用菌术语 GB 15569 农业植物调运检疫规程 NY 5099 无公害食品食用菌栽培基质安全技术要求。 3 术语和定义 GB ／T 12728－1991 和附录A （规范性附录）确立的术语和定义适用于本部分。 4 要求 4.1 制种要求 4.1.1 母种（一级种）制作 4.1.1.1 种菇要求 1 DB33 400.1－2003 种菇由取得母种（一级种）生产许可证单位制作，并应满足下述要求： a) 无病虫害，菌蕾整齐、均匀； b) 以菌蕾作为分离材料，菌蕾白色至粉红色； c) 菌蕾达到八、九分成熟。 4.1.1.2 培养基 采用马铃薯琼脂培养基 （PDA ）或改良马铃薯琼脂培养基 （改良PDA ），配方见附录 B （资料性附录）。 4.1.1.3 培养基制作 将去皮马铃薯切片置容器内加水 1000mL，煮沸 15min，过 ，加入琼脂，补足水至 1000mL，继续加热溶解；待琼脂溶解后，加入葡萄糖搅拌，用分装器装入试管中，装量为 2 试管长的 1 ／5，塞上棉塞。置灭菌锅中，在 0.15MPa （1.5kg ／cm ）压力下灭菌 15min， 将试管趁热排放在斜面板上自然冷却。 4.1.1.4 组织分离与纯化 在无菌条件下切取菌蕾其内部菌柄尖端处直径 2mm~3mm 的组织块，接种到斜面培养 基上，在 23℃~ 25℃条件下培养 25d~35d，见菌丝长满斜面即进行菌丝纯化。 4.1.1.5 转管扩繁 经出菇鉴定合格的母种，在无菌条件下以 1:20进行转管，置 23℃~ 25℃环境中培养， 菌丝满管后，供扩制原种用，对暂不使用的母种贴好标签，置 5℃~ 7℃环境中保存，一般 扩繁 3 次~5 次。 4.1.2 原种、栽培种制作 4.1.2.1 培养基 采用木屑培养基，配方见附录 B （资料性附录）。 4.1.2.2 装料 2 DB33 400.1－2003 将培养料拌匀，原种装入菌种瓶中，至瓶 4 ／5 处，上紧下松，料面压平压实，用符 合 NY 5099 规定的生活饮用水洗净瓶身和瓶口，擦干瓶口后，套好颈圈 （套环）用棉塞封 口并包扎牛皮纸，或其他能满足正常发菌的材料封口。 将培养料拌匀，栽培种装入菌种 中，至 4 ／5 处，上紧下松，料面压平压实，用 清水洗净 身和 口，擦干 口后，套好颈圈 （套环）用棉塞封口并包扎牛皮纸，或其他 能满足正常发菌的材料封口。 4.1.2.3 灭菌 2 在 0.15MPa （1.5kg ／cm ）压力下灭菌 3h。 4.1.2.4 接种 培养料冷却至 28℃以下，在无菌条件下接种，每支母种接 6 瓶~ 7 瓶原种；每瓶原种 接 45 ~ 50 栽培种。 4.1.2.5 培养 培养应符合以下要求: