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ICS 7 1.040 G 04 案号:14769-2004 DB33 浙 江 省 地 方 标 准 DB33/T 454 2003 动物血清中盐酸克伦特罗残留的检测方法 The analysis of clenbuterol hydrochloride in animal serum 2003-10-23 发布 2003-11-08 实施 浙江省质量技术监督局 发布 DB33/T 454 2003 前 言 本标准由嘉兴市卫生监督所提出并归口。 本标准由嘉兴市卫生监督所、浙江省畜产品质量安全检测中心、嘉兴市疾病预防控制中心、浙江省 疾病预防控制中心负责起草。 本标准主要起草人:吴小龙、沈志英、邹忠明、宣士荣、吴平谷、葛志坚、王明龙、汪刚。 I DB33/T 454 2003 动物血清中盐酸克伦特罗残留的检测方法 1 范围 本标准规定了以酶联免疫吸附(ELISA)法和气相色谱-质谱联用(GC/MS )法测定动物血清中盐 酸克伦特罗的 法,规定气相色谱-质谱联用法为仲裁法。 法适用于动物血清中盐酸克伦特罗残留量的测定与仲裁。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过 标准的引用而成为 标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的 修改单 (不包括勘误的内容)或修订版均不适用于 标准,然而,鼓励根据 标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版 适用于 标准。 DB33/T 307-2001 可食性动物组织中盐酸克伦特罗残留量的检测 法 DB33/T 308-2001 饲料中盐酸克伦特罗含量的检测 法 DB33/T 309-2001 动物尿液中盐酸克伦特罗残留量的检测 法 3 酶联免疫吸附法 3.1 原理 利用固相酶联免疫吸附原理,将盐酸克伦特罗特异性抗体 羊抗兔 包被于聚苯乙烯微量反应板 ( IgG ) 中,加入血清、盐酸克伦特罗标准品、酶标记物、盐酸克伦特罗抗体于微孔中,使血清(未知抗原)和 酶标记物中的盐酸克伦特罗抗原 ( 知抗原)与抗体进行免疫竞争反应,未反应的酶标记物在洗涤中被 清除,结合了的酶可以由显色物显示出来。用目测法或酶标法来判断。显色的强弱与样品中的盐酸克伦 特罗浓度成反比。 3.2 试剂和材料 以下所用的试剂和水,除特别注明者外均为分析纯试剂,水为重蒸水。 3.2.1 盐酸克伦特罗固相酶联免疫试剂盒 (德国 r-Biopharm 公司或类似产品)。 3.2.1.1 预包被微孔条。 3.2.1.2 标准品(6 瓶×300 μL/瓶,浓度分别为0ppt、100ppt、300ppt、900ppt、2700ppt、8100ppt )。 3.2.1.3 盐酸克伦特罗酶标记物。 3.2.1.4 盐酸克伦特罗抗体。 3.2.1.5 基质液。 3.2.1.6 终止液。 3.2.1.7 缓冲液。 3.2.2 50%乙醇。 3.3 设备与器材 3.3.1 酶标仪。 3.3.2 洗板机。 3.3.3 离心机 (3000 r/min -4000r/min)。 3.3.4 超声清洗仪。 3.3.5 振荡器。 3.3.6 水浴锅。

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