172-郑照丞-肝糖原的提取鉴定和定量-2014级预防医学-第6实验室.docVIP

生物化学实验报告 姓 名： 郑 照 丞 学 号：3140090172 专业年级： 2014级预防医学 组 别： 第六实验室 生物化学与分子生物学实验教学中心 实验名称 肝糖原的提取、鉴定与定量 实验日期 2016/01/08 实验地点 第六实验室 合作者 葛海东 指导老师 总分 教师签名 批改日期 一、实验目的 学会和掌握肝糖原提取和鉴定的原理和方法。 正确掌握使用离心机的方法步骤。 二、实验原理 实验1 肝糖原的提取与鉴定 （一）分离糖原及提取 储存于肝细胞内的糖原，可先采用研磨匀浆等方法使细胞破碎，低浓度的三氯醋酸使蛋白质变性，破坏肝组织的酶且沉淀蛋白质，而糖原任然稳定地保存于上清液中，因而使糖原可与蛋白质等其他成分分离开来。又糖原溶于水不溶于乙醇，故先用95%乙醇将滤液中糖原沉淀再溶于热水中。 （二）糖原鉴定 （1）））））） 肝匀浆准备 称取肝组织约1.5g，放入盛有1ml5%三氯醋酸的研钵中，将肝组织磨至乳状后，再加入5%三氯醋酸3ml，在磨成肝匀浆，4000r/min离心3min，取上清液3ml另一干净离心管中。 （2）提取糖原 向上清液中加入3ml的95%乙醇，混匀，静置10min，离心5min（4000 r/min） （3）糖原鉴定 ①与碘反应：取碘试剂2滴于白瓷板孔穴中，加糖原溶液1