大鼠胰岛素（INS）定量检测试剂盒（ELISA）使用说明书.PDFVIP

本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。 INS ELISA INS ELISA 大鼠胰岛素（IINNSS）定量检测试剂盒（EELLIISSAA） 使用说明书 【试剂盒名称】 INS ELISA 大鼠胰岛素（ ）定量检测试剂盒（ ） 【试剂盒用途】 定量检测大鼠血清、血浆及相关液体样本中胰岛素（INS）的含量。 【检测原理】 本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA）。将标准品、待测样本加入到预 先包被大鼠胰岛素（INS）单克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤除去未结合 A B 的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加入底物 、 ， 底物（TMB）在辣根过氧化物酶（HRP）催化下转化为蓝色产物，在酸的作用下变成黄色， 颜色的深浅与样品中大鼠胰岛素（INS）浓度呈正相关，450nm波长下测定OD值，根据标准 INS 品和样品的OD值，计算样本中大鼠胰岛素（ ）含量。 【试剂盒组成】 1 酶标包被板 12 孔×8条 7 显色剂A液 6mL 2 标准品 0.3mL×6 管 8 显色剂B液 6mL 3 20倍浓缩洗涤液 25mL 9 终止液 6mL 4 样本稀释液 6mL 10 说明书 1 份 5 特殊稀释液 6mL 11 封板膜 2 张 6 酶标试剂 6mL 12 密封袋 1 个 备注：标准品（1号→6号）浓度依次为：16、8、4、2、1、0.5mU/L。 【需要而未提供的试剂和器材】 1、37℃恒温箱 2、标准规格酶标仪 3、精密移液器及一次性吸头 4、蒸馏水 5、一次性试管 6、吸水纸 【操作步骤】 1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。 2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。 3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、 待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先 1 10μL 40μL 5 加入待测样本 ，再加样本稀释液 （即样本稀释 倍）；空白对照孔不加。 4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。 5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸 4 上拍干，如此重复洗板 次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。 6、加酶标工作液：每孔加入酶标工作液50μL，空白对照孔不加。 7、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。 8、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸 上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。 9、显色：每孔先加入显色剂A 液50μL，再加入显色剂B液 50μL，平板混匀器混匀30s 30s 37 （或用手轻轻震荡混匀 ）， ℃避光显色15min。 10、终止：取出酶标板，每孔加终止液50μL，终止反应（颜色由蓝色立转黄色）。