第六章 灭菌及染菌的防治(2013生).pptVIP

4．防止空气引起的染菌 空气冷却器的列管穿孔泄露，冷却水会渗入到空气中，造成染菌。 棉花-活性炭过滤器长期使用后，棉花和活性炭的体积被压缩而松动，如果上下端棉花铺得厚薄不均，厚的一边阻力大空气不畅通，薄的一边空气容易通过，久而久之，薄的一边长期受空气顶吹而使棉花活性炭改变位置，造成过滤器失效。 5、发酵染菌后的措施 染菌后的培养基必须灭菌后才可放下水道。灭菌方法：可通蒸汽灭菌，也可加入过氧乙酸等化学灭菌剂搅拌半小时，才放下水道。否则由于各罐的管道相通，会造成其它罐的染菌，而且直接放下水道也会造成空气的污染而导致其它罐批染菌。 凡染菌的罐要找染菌的原因，对症下药，该罐也要彻底清洗，进行空罐消毒，才可进罐。 染菌厉害时，车间环境要用石灰消毒，空气用甲醛熏蒸。特别，若染噬菌体，空气必须用甲醛蒸汽消毒。 （一）染噬菌体对发酵的影响 　　发酵过程中如果受噬菌体的侵染，一般发生溶菌，随之出现发酵迟缓或停止，而且受噬菌体感染后，往往会反复连续感染，使生产无法进行，甚至使种子全部丧失。 三 .染噬菌体的防治 （二）产生噬菌体的原因 通常在工厂投产初期并不感到噬菌体的危害，经过1~2年以后，主要是由于生产和试验过程中不断不加注意地把许多活菌体排放到环境中去，自然界中的噬菌体就在活菌体中大量生长，造成了自然界中噬菌体增殖的好机会。这些噬菌体随着风沙尘土和空气流动传播，以及人们的走动、车辆的往来也携带着噬菌体到处传播，使噬菌体有可能潜入生产的各个环节，尤其是通过空气系统进入种子室、种子罐、发酵罐。 在培养皿上倒入培养生产菌的培养基（加琼脂）作下层。同样的培养基中加入20％～30％培养好的种子液，再加入怀疑染噬菌体的发酵液，摇均匀后，铺上层。培养过夜观察培养皿上是否出现噬菌斑。 也可以在上层培养基中不加怀疑染噬菌体的发酵液，而将发酵液直接点种在上层培养基表面，培养过夜，观察有无透明圈出现。 （三）染噬菌体的检测 （四）噬菌体的防治 1、必须建立工厂环境清洁卫生制度，定期检查、 定期清扫，车间四周有严重污染噬菌体的地方应及时撒石灰或漂白粉。 2、车间地面和通往车间的道路尽量采取水泥地面 3、种子和发酵工段的操作人员要严格执行无菌操作规程，认真地进行种子保管，不使用本身带有噬菌体的菌种。感染噬菌体的培养物不得带入菌种室、摇瓶间 4、认真进行发酵罐、补料系统的灭菌。严格控制逃液和取样分析和洗罐所废弃的菌体。对倒罐所排放的废液应灭菌后才可排放。 5、选育抗噬菌体的菌种，或轮换使用菌种。 6、发现噬菌体停搅拌、小通风，将发酵液加热到70~800C杀死噬菌体，才可排放。发酵罐周围的管道也必须彻底灭菌。 * 思考题 1.简述灭菌的基本方法？ 2.简述发酵染菌的原因及防治措施。 按用途分基础培养基、加富培养基、鉴别培养基、选择培养基。 * 高温灭菌（消毒）法——是最常用的物理方法。高温可引起蛋白质、核酸等活性大分子氧化或变性失活而导致微生物死亡。 * 微波:通过热产生杀死微生物的作用； 紫外线(UV):使DNA分子中相邻的嘧啶形成嘧啶二聚体，抑制DNA复制与转录等功能，杀死微生物； X射线和y射线:使其他物质氧化或产生自由基(OH·、H·)破坏和改变生物大分子的结构，以抑制或杀死微生物。 * 如有杂菌，可引起以下的后果：①生产菌和杂菌同时在培养基中生长，结果丧失了生产能力。②杂菌的生长速度有时比生产菌生长得快，结果使反应器中以杂菌为主。③杂菌会污染最终产品。④杂菌所产生的物质，使提取产物时发生困难。⑤杂菌降解所需要的产物。⑥发酵如污染了噬菌体，可使生产菌株发生溶菌现象。 * * 发酵对空气无菌程度的要求： 一般要求1000次使用周期中只允许有一个菌通过，即经过滤后空气的无菌程度为N=10-3。 -空气中微生物(包括细菌、酵母、霉菌和病毒) 含量一般为103 ~ 104个／米3。一般附着在空气中的灰尘上或雾滴上。 -灰尘粒子的平均大小约0.6μm左右，空气除菌主要去除空气中的微粒(0.6~1μm）。 * 会产生混浊或形成不溶性沉淀 （有机沉淀物如多肽类，无机沉淀物如磷酸盐）； 改变某些营养成分： 1)低pH下，糖类、琼脂发生水解； 2）PO4-3存在，葡萄糖生成酮糖，菌不利用； 3）色深：还原糖羧基与蛋白质、氨基酸等在高温下 发生maillard反应，使糖、蛋白质等失去营养。 形成有害物质，抑制微生物生长； pH下降（通常下降0.2）； 改变培养基的体积与浓度。 * 这不是一个概念，一个是压力，一个是压强。 在工业中倒是常用，通常1公斤压力表示100KPa 也就是说一公斤压力表示一个大气压 也可以说 1公斤压力等于76