猪人工授精技术规程行业标准.docVIP

猪人工授精技术规程行业标准 1 范围本标准规定采精、精液品质检查、精液的稀释、分装、贮存与运输、输精等人工授精技术环节，适用于猪的人工授精操作。2 采精2.1? 公猪调教2.1.1? 调教年龄? 后备公猪7-8月龄可开始调教，有配种经验的公猪也可进行采精调教。2.1.2? 调教方法? 将成年公猪的精液、包皮部分泌物或发情母猪尿液涂在假台猪后部，将公猪引至假台猪训练其爬跨，每天可调教1次，但每次调教时间最好不超过15min。2.2? 采精方法2.2.1? 采精前准备?? 采精公猪的准备：剪去公猪包皮的长毛，将公猪体表赃物冲洗干净并擦干体表水渍。?? 采精器件的准备：集精器置于38的恒温箱中备用。当公猪引至采精室后，迅速取出集精器，另外应准备好采精时清洁公猪包皮内污物的纸巾或消毒清洁的干纱布等。? 配置精液稀释液：配置好所需量的稀释液，置于在水浴锅中预热至35。精液质检设备的准备：调节好质检用的显微镜，开启显微镜载物台上恒温板以及预热精子密度测定仪。? 精液分装器件的准备：准备好精液分装器、精液瓶或袋等。2.2.2? 采精程序?? 采精员一手带双层手套，另一手持37保温杯（内装1次性食品袋）用于收集精液，用0.1%高锰酸钾溶液清洗其腹部和包皮，再用温水清洗干净，避免药物残留对精子的伤害。? 采精员挤出公猪包皮积尿，按摩公猪包皮，刺激其爬跨假台猪，待公猪爬跨假台猪并伸出阴茎，脱去外层手套，用手（大拇指与龟头相反方向）紧握伸出的公猪阴茎螺旋状龟头，顺其向前冲力将阴茎的“S”状弯曲拉直，握紧阴茎龟头防止其旋转。待公猪射精时用四层纱布过滤收集浓份或全份精液于保温杯内的一次性食品袋内，最初射出的少量（5mL左右）精请不接取，直到公猪射精完毕，一般射精过程历时5—7min。? 集精杯位置应高于包皮部，可防止包皮部液体流入集精杯内。2.3? 采精频率? 采精频率以单位时间内获得最多的有效精子数来决定，做到定时、定点、定人。成年公猪每周采精不超过2次，青年公猪每周1次。3 精液品质检查3.1? 采精量?? 采集精液后称重，按每克1mL计，避免以量筒等测量精液体积。3.2? 颜色? 正常的精液是乳白色或浅灰色，精子密度越高，色泽愈浓，其透明度愈低。如带有绿色、黄色、浅红色、红褐色等异常颜色的精液应废弃。3.3? 气味? 猪精液略带腥味，如有异常气味，应废弃。3.4 pH值（酸碱度）? 以pH计或pH试纸测量，正常范围7.0～7.8。3.5? 精子5 精子活力检查? 精子活力是指呈直线运动的精子所占百分率，在显微镜下观察，一般按0.1～1.0的十级评分法估计，鲜精活力要求不低于0.7，检查活力时要求载玻片和盖玻片都应37预热。3.6? 精子密度? 指每毫升精液中所含的精子数，是确定稀释倍数的重要标准。要求用血细胞计数板计数或精液密度仪测定。血细胞计数方法：1）以微量加样器取具有代表性原精液200μL，用3%NaCl稀释10倍；2）在血细胞计数板上放一盖玻片，取1滴稀释液后精液置于计数板的槽中，靠虹吸将精液吸入计数室内；3）在高倍镜下计数5个中方格内的精子总数，将该数乘以50万，即得原精液每毫升的精子数（即精液密度）。3.7? 精子畸形率? 畸形率是指异常精子的百分率，一般要求畸形率不超过18%，其测定可用普通显微镜，但需伊红或姬姆萨染色，相差显微镜可直接观察活精子的畸形率，公猪使用过频或高温环境会出现精子尾部带有原生质滴的畸形精子。畸形精子种类很多，如：巨型精子、短小精子、双头或双尾精子，顶体膨胀或脱落、精子头部残缺或尾部分离、尾部变曲。要求每头公猪每两周检查一次精子畸形率。3.8? 填写公猪精液品质检查登记表（见附录A）● 考虑因素：哪些猪允许采精，应有些规定，精液产品，人工授精操作人员是否采用资格证书？4 精液稀释、分装、贮存和运输4.1? 稀释液4.1.1? 稀释液按稀释液配方（见附录B），用称量纸、电子天平准确称量药品。4.1.2? 按1 000mL、2 000mL剂量称量稀释粉，置于密封袋中。4.1.3? 使用前1h将称量好的稀释粉溶液于定量的双蒸水中，可用磁力搅拌器助其溶解。4.1.4? 用0.1N稀盐酸或0.1N氢氧化钠调整稀释液的pH值为7.2（6.8- 7.4）左右，稀释液配好应及时贴上标签，标明品名、配制日期和时间、经手人等。4.1.5? 稀释液冰箱4保存，不超过24h。4.2? 精液稀释4.2.1? 精液采集后应尽快稀释，原精贮存不超过30min。4.2.2? 未经品质检查或检查不合格（活力0.7以下）的精液不能稀释。4.2.3? 稀释液与精液要求等温稀释，两者温差不超过1，即稀释液应加热至33～37，以精液温度为标准，来调节稀释液的温度