电化学方法研究槲皮素和探针中性红与DNA的竞争作用论文.pdfVIP

第九届全国电分析化学学术会议论文摘要集 B传统电分析华学(鱼塑壅塑塞! B鲰 靴学方法研究槲皮素和探针中性红与DNA的竞争作用 杜姗倪永年木 (南昌大学化学系，南昌330047) 槲皮素是许多天然中草药中的有效成分，是目前已知的最强抗癌剂之一，能在毫摩尔级 浓度直接阻滞癌细胞增殖，还有保护细胞不受致癌物损害的作用，所以研究槲皮素和DNA的 相互作用能够为中草药的药理研究提供一定的理论依据。本论文采用电化学方法研究槲皮素 和DNA的相互作用，并使用中性红作为探针，获得了比较满意的结果。中性红州R)是一种吩 嗪染料，含有平面吩嗪环，环的特征(分子大小，电子云密度等)与许多DNA分子嵌插剂相似， 所以能够与DNA发生嵌插作用。 循环伏安实验发现，槲皮素在pH 氧化还原峰(图1)，氧化还原峰电位之差△E为7lmV，条件电位为氧化还原峰电位的平均值E，o 为204mV，该电极反应过程为准可逆过程。氧化峰峰电流和还原峰峰电流都与扫速1，成良好 的线性关系，而与v¨2成偏离直线向上弯曲，表明槲皮素在扫速范围内的电化学行为受吸附控 制。往该溶液中加入DNA后重新进行CV测定，发现槲皮素的氧化和还原峰峰电流均减小， 表明槲皮素与DNA发生了较强的相互作用，而且峰电位都正移，说明槲皮素与DNA之间可 能存在嵌插作用。根据公式舡o=矿b一∥f=59．1 519(KR／Ko)可算出KRIKo=1．53，说明槲皮素和 DNA的缔合常数是其氧化形式和DNA的缔合常数的1．53倍，这从图中也可以看出，还原峰 电流减小的程度比氧化峰电流减小的程度要小得多。图2为5．0x10-6m01．1-l NR在pH=7．4的 Tris．Hcl缓冲溶液中，扫描速度为100 mV．s叫玻碳电极上的循环伏安曲线，从曲线l中可观察 到一对氧化还原峰，峰电位分别为．576和．525mV，峰电位差为5lmV，计算得的氧化还原式 电位El／2=．55lmV。当往溶液中加入不同浓度的DNA时(图中曲线2．6)，还原峰电流下降明显， 而氧化峰的电流降低程度较小，峰电位也向正方向移动，表明了NR与DNA相互作用时形成 的化合物为非电活性化合物，该化合物不能在电极表面发生还原反应。 coo一 图l 槲皮素与DNA相互作用的循环伏安图 图2中性红与DNA相互作用的循环伏安图 10。5mol／L c(NR)-5．0xlO。6mol／L c(quercetin)：2．5x 【DNA]／(x10一mol／L)：1．0；2．1．23：3．2．46 【DNA]／(x10一mol／L)：1．0：2．4．92；3． 9．84：4．14．76 4．3．69：5．4．92：6．6．15 向NR-DNA体系中加入槲皮素。由图3可见，随着槲皮素的不断加入，NR的还原峰峰电流 增大，而槲皮素在236mV处的氧化峰峰电流也不断增人。在排除了NR与槲皮素反应后，认为 127 第九届全国电分析化学学术会议论文摘要集 B传统电分析化学(含机理研究) 是槲皮素的加入能占据部分与NR作用[拘DNA作用位点，从而释放出一定量自由的NR，使得 溶液中NR浓度有所增加，导致其峰电流增大，而加入的槲皮素并未全部参与反应，因此峰电 流也增大。这表明NR与槲皮素矛HDNA作用方式及作用位点均相同，因此两者之间可产生竞争 作用，而NR与DNA的作用是嵌插模式，进而表明槲皮素与DNA也发生嵌插作用。由此可见， 使用中性红作为作用方式探针，可以比较方便地研究药物与DNA的作用模式。 《cooS 图3 不同浓度的槲皮素对NR．DNA循环伏安曲线的影响 c(NR)：5．0x10一mol／L：e(DNA)：14．76×10‘6mol／L 参考文献 C．Z．，Li RTalanta,2001，