浅析实验十三血清尿素氮测定（脲酶—Berthelot比色法）.docVIP

实验十三　血清尿素氮测定（脲酶—Berthelot比色法） 一、 实验目的与要求 1 了解血液尿素氮（BUN）在人体营养学上的生理学意义及其在代谢上的重要性。 2 掌握血液尿素氮测定方法及721分光光度计或AT648半自动生化多用仪的使用方法和现代生化检测试剂盒的应用。 二、 实验原理 尿素在脲酶作用下分解生成氨。在碱性条件下，经次氯酸氧化生成的氯胺与苯酚被亚硝基铁氰化钠催化生成蓝色的靛酶。其反应式为： CH2NH2N尿素O+HOH脲酶NH3彩+CHOH2N氨基甲酸O-2NH3+CO2 氨 NH3+OCl-NH2Cl+OH- 次氯酸氨胺催化剂 NH2Cl+OH+OH-Cl-+H2O+HONH2 苯酚P胺基苯酚 HONH2+OH-+O2==N——O-+H2O 酚靛三、 实验仪器与试剂 1 仪器 （1） AT648半自动生化分析仪1台； （2） 4孔恒温水浴锅1个； （3） 振动摇床1台。 2 分组及仪器2人一组，每组仪器包括： （1） 试管架1个； （2） 2ml试管10个； （3） 20μl微量加样器1个； （4） 1ml移液管1个； （5） 5ml移液管2个； （6） 吸耳球1个； （7） 搪瓷盘1个； （8） 微量加样滴头； （9） 吸水纸。 3 本试剂盒内含5种试剂： （1） 脲酶（冻干）