动物源性肠球菌的分离鉴定及耐药性分析.pdfVIP

一 31一 中国动物检疫 2008年第25卷第1期 』 主持人：庞素芬 fe 40@h。 m il m 动物源性肠球菌的分离鉴定及耐药性分析 赵丽青 雷质文 王树峰 贾俊涛 房保海 刘云国 马卫兴 林修光 f山东出入境检验检疫局 266002) 摘 要：了解肠球菌的耐药性，对控制该茵引起的感染，研制新一代抗茵药物具有重要价值。本试验从84种样 品中分离鉴定出69株肠球菌，通过抗生素耐药性试验，发现肠球菌对多数抗生素表现出不同程度的耐药性．如青霉 素耐药达52．2％、四环素达71．0％、万古霉素达85．5％。本文对肠球菌的分离与鉴定．药敏试验及风险分析三个方面作 了分析和阐述。 关键词：肠球菌：分离鉴定：耐药性分析 肠．球菌(Entemcoccus)是人类和 表1 样品采集情况 (2007年) 从TSA—YE琼脂平板或BHV琼 动物肠道中正常栖居菌 常见于腹部 脂平板上挑取单个菌落．分别接种到 感染所分离出的混合菌丛中 过去一 6．5％NaC1肉汤、七叶苷生化管中。在 直认为肠球菌是人体的无害共栖菌． 36-+1oC培养箱中培养。培养24 h。观 但最近发现肠球菌也具有致病潜力． 察实验结果 6．5％NaC1肉汤出现浑 会引起人体疾病的发生 由于该菌对 I~C培养箱中进行前增菌培养．培养 浊说明结果为阳性．七叶苷变成黑色 多种抗生素呈固有耐药．又易产生获 18-24h。 者说明结果为阳性 (如图)。如果 得性耐药 因此对肠球菌耐药性及其 1．2．3 细菌的选择性培养 6．5％NaC1肉汤出现浑浊不明显或根 流行趋势的监测十分重要 本试验通 根据样品编号分别对SBM琼脂 本不浑浊．七叶苷变黑不明显或不出 过对青岛市城阳区动物源性食品的肠 培养基进行编号．每一种样品做两个 现黑色，说明结果可疑。则需要更进 球菌的分离鉴定．然后用K-B法对9 梯度(10倍和100倍)．每一种梯度分 一 步试验证明可疑菌种是否为肠球 种药物耐药性检测．研究本地区现阶 别重复涂布2个SBM琼脂培养基． 菌 从3批样品分离肠球菌的结果 段动物源性食品微生物耐药性的高 观察结果 (表2)。 低．进而分析动物饲料添加抗生素剂 1．2．4 细菌的分离培养 表2 样品中肠球菌分离结果 量的变化．并且对动物使用抗生素对 培养l8 24h后．观察实验结果 批 碍期 样品总数 肠球茵 阳性率 人类和环境带来的风险性分析 筛选出在SBM琼脂平板上的可疑菌 次 (碍／f1) (种) (种) (％) 1 材料与方法 落．挑取可疑单个菌落。接种到所对 第一批 21／3 46 43 93．5 1．1 材料 应KAAAB琼脂平板上 放入44℃培 第二批 9／4 17 12 70．6 培 养基 ：SBM 琼脂 培养基 养箱中，培养l8 24 h后，观察结果。 第三批 23／5 21 14 66-7 (SLANE I’ZBAR Ⅱ点Y MEDIUM)、 1．2．5 细菌的纯化培养 2．2 药敏试验 KAAAB琼脂培养基(KANAMYCIN 培养 l8 24 h后．取出KAAAB 培养24 h后取出平板．在透射光 AESCULIN AZIDE AGAR BASE 均 琼脂平板，观察实验结果。挑取单个 下用游标卡尺量各纸片的抑菌直径． 为进口培养基．来自Oxoid Ltd，Bas— 菌落．接种到，I’SA—YE平板或BHV 抑菌环的边缘以肉眼见不到细菌明 ing—stoke．Hant