第四章 萃取法.ppt

一、基本原理 表面活性剂溶于非极性溶剂中，并使其浓度超过临界胶束浓度，便会在有机溶剂内形成聚集体，非极性基团在外，极性基团则排列在内，形成一个极性核，此极性核具有溶解极性物质的能力。当含有此种反胶束的有机溶剂与蛋白质的水溶液接触后，蛋白质及其他亲水性物质能够溶于极性核内部的水中，由于周围的水层和极性基团的保护，蛋白质不与有机溶剂接触，从而不会造成失活。 二、反胶束体系 在反胶束萃取的早期研究中多用季胺盐，目前用得最多的是AOT，其化学名为丁二酸乙基己基酯-磺酸钠。 三、反胶束萃取过程 反胶束选择性分离目标蛋白质包括两个过程:萃取过程(forward extraction)和反萃取过程(backward extraction)。 萃取过程:目标蛋白质从主体溶液转移至反胶束溶液中的过程； 反萃取过程:目标蛋白质从反胶束溶液中转移至第二水相(或以固体的形式游离出来)的过程。这些过程可连续操作，反胶束可在两套系统中循环。 反胶束相 混合器1 分离器1 混合器2 分离器2 进料 前萃取 后萃取 出料 四、影响因素 表面活性剂的种类 早期用一种表面活性剂,现在混合体系的研究较多 水相pH值 决定蛋白质表面带电基团的离子化状态,与表面活性剂的头部基团有相互作用. 温度 提高温度可使反胶束排斥水,起浓缩作用 离子强度 降低带电蛋白与反胶束极性基团的相互作用,并导致高离子强度下反胶束颗粒变小 亲和反胶束萃取 导入亲合配基,提高萃取率和选择性 五、应用举例 （一）蛋白质类药物 如蛋白酶、脂肪酶等 （二）、氨基酸 亲水性不同,疏水氨基酸主要在反胶束界面;亲水性氨基酸在反胶束内部极性水中 （三）、抗生素 如胆甾醇-D-丙氨酰胺-D-丙氨酸酯 （四）、核酸 第六节 超临界流体萃取法 超临界流体（supercritical fluid ，简称SCF）萃取技术，又称压力流体萃取、超临界气体萃取、临界溶剂萃取等，是利用处于临界压力和临界温度以上的一些溶剂流体所具有特异增加物质溶解能力来进行分离纯化的技术。 一、基本原理 当气体物质处于其临界温度(Tc)和临界压力(Pc)以上时，不会凝缩为液体，只是密度增大，具有许多特殊的物理化学性质： 流体的密度接近于液体的密度,粘度接近于气体；在临界点附近,超临界流体的溶解度对温度和压力的变化非常敏感； 利用CO2作为萃取剂主要有以下优点: (1) 二氧化碳超临界温度(Tc=31.06℃)是所有溶剂中最接近室温的，可以在35～40℃的条件下进行提取,防止热敏性物质的变质和挥发性物质的逸散。 (2)在CO2气体笼罩下进行萃取,萃取过程中不发生化学反应;又由于完全隔绝了空气中的氧,因此,萃取物不会因氧化或化学变化而变质。 (3)由于CO2无味、无臭、无毒、不可燃、价格便宜、纯度高、容易获得,使用相对安全。 (4)CO2是较容易提纯与分离的气体,因此萃取物几乎无溶剂残留,也避免了溶剂对人体的毒害和对环境的污染。 (5) CO2扩散系数大而粘度小,大大节省了萃取时间,萃取效率高。 二、影响超临界流体萃取的因素 （一）压力的影响 压力增加，绝大多数化合物溶解度都急剧上升。 根据萃取压力的变化,可分为3类基本应用: 一是高压区的全萃取，高压时,SCF的溶解能力强,可最大限度地溶解大部分组分； 二是低压临界区的脱臭，在临界点附近,仅能提取易溶解的组分,或除去有害成分; 三是中压区的选择萃取，在高低压区之间,可根据物料萃取的要求,选择适宜压力进行有效萃取。 （二）温度的影响 一个是温度对流体密度的影响，随温度升高，CO2流体密度降低，导致其溶剂化效应下降，对物质的溶解度也下降； 另一个是温度对物质蒸气压的影响，随温度升高，物质的蒸气压增大，使物质在CO2流体中的溶解度增大。 (三)、助溶剂 当在CO2流体中加入少量第二溶剂，可以大大提高其对原来溶解度很小的溶质的溶解能力，这种第二组分溶剂称为辅助溶剂（entrainer），又称助溶剂。 从经验上看，加入极性助溶剂对提高极性成分的溶解度有帮助，对非极性溶质作用不大；相反，非极性助溶剂对极性和非极性溶质都有增加溶解度的效能。 （四）、物料性质的影响 物料的粒度影响 细物料可增加传质效果，但过细增加流动阻力 细胞破壁 水分 含水量过高时，形成 连续性水膜，影响传 质过程 三、超临界萃取的流程 四、在生物制药领域的应用 ⑴ 具有广泛的适应性： ⑵ 萃取效率