磁性固相萃取吸附剂研究的新进展论文.pdfVIP

· 94 · 色 谱 第 31卷 3 磁性氧化碳纳米管用于细胞 内核酸相关蛋 白质 材料无需其他的样品净化步骤即可直接从富含蛋 白 的提取 质的生物样 品中萃取小分子 的药物。此外，c8- 核酸相关蛋白质在基因调控和蛋白质表达过程 FeO@mSiO：还可通过结合其他分子识别材料 中具有非常重要的作用。对细胞内核酸相关蛋白质 (如分子印迹聚合物)，进一步提高其选择性。 的整体分析有助于更好地理解核酸和相关蛋 白质之 5 磁性管 内固相微萃取技术 间的相互作用 。然而 ，由于缺乏高效 的 目标蛋 白质 1997年 ，管内固相微萃取技术 (IT—SPME)被首 组提取方法 ，核酸相关蛋 白质 的大规模分析还具有 次提出，这一技术使萃取、解吸附和进样 自动完成， 很大难度。 目前的研究表明功能化碳纳米管具有优 有效地缩短 了分析时间，改善 了分析结果 的精密度 异的生物相容性 ，大的比表面积 ，且对核酸及连接核 和准确性。但 由于吸附剂用量相对较小 ，IT—SPME 酸的蛋白质具有很强的吸附作用，因此近年来在核 对 目标分析物的萃取效率很低。为解决这一 问题， 酸的相关研究领域(如基因载体、核酸传感器等)得 许多研究人员不断努力 以提高这一技术的萃取效 到了广泛 的应用 。最近邹汉法课题组 首次使用 率 ，如采用新 的吸附剂或使用毛细管整体柱等。最 磁性氧化碳纳米管从细胞中高效提取了一组核酸及 近 ，Moliner-Martinez等 提 出一种磁性 IT-SPME 相关蛋 白质。该方法先用强酸将多层碳纳米管氧化 技术，有效地改善了 目标化合物的萃取效率。他们 获得氧化碳纳米管 (oMWCNTs)，随后用水热法使 将合成的磁性 FeO@SiO 微球固定在石英毛细管 Fe0 纳米颗粒沉积在氧化碳纳米管上 ，形成磁性 柱中，将这一毛细管柱放置在一个可 以改变磁场强 氧化碳纳米管 (oMWCNT@FeO )。之后 ，利用 度的电磁线圈中，该毛细管柱两端连接在一个六通 oMWCNT@FeO 富集细胞 内核酸及相关蛋 白质 ， 阀上。利用这一装置萃取抗磁性的 目标分析物 ，使 实现了活细胞核酸相关蛋 白质 的规模化提取和鉴 其富集在磁场强度小 的区域。相 比传统 的 IT— 定。实验结果表 明，oMWCNT@FeO 对体外培养 SPME技术 ，磁性 IT—SPME对 目标化合物具有更高 的细胞 内核酸的萃取率接近 100％。更重要的是，连 的萃取效率。在传统的IT—SPME萃取过程中，目标 接在核酸上的相关蛋 白质也能够很好地被 oMwC— 分析物伴随着流动相的流动被局部吸附在毛细管内 NT@FeO 捕获 ，证明了这一方法对少量细胞样品 壁上 ，这种吸附是不完全的，且大部分 目标分析物尚 中核酸相关蛋白质组学分析具有非常重要 的意义。 未被吸附便被流动相带走。但在磁性 IT—SPME过 进一步的研究显示 ，大多数被识别的核酸相关蛋 白 程中，外加磁场将毛细管 内壁 的Fe，O@SiO：微球 质是亲水弱酸性蛋 白质 ，这些蛋 白质包含 了很多重 磁化 ，并产生 了不同的磁场梯度。抗磁性 目标化合 要的细胞功能，如基因表达、基因代谢和信号传导