超高压液相色谱-高分辨飞行时间质谱仪校验方法.docx

超高压液相色谱-高分辨飞行时间质谱仪校验方法1 概述本规程适用于超高压液相色谱-高分辨飞行时间质谱仪周期检定。2 仪器技术指标2.1 外观和标志：外观应完好无损；标志应齐全、清晰。2.2 气源供给：在正常操作条件下，所有气路连接处应无泄漏。2.3 电源供给：电源供给的电压、频率等技术要求应符合仪器说明书的规定。2.4 性能指标：见表1。表1 性能指标正离子模式负离子模式平均信噪比≥1000:1≥1000:1峰面积的平均标准偏差≤3.0%≤3.0%质量测定准确度≤2.0ppm≤2.0ppm保留时间重复性≤0.047min≤0.047min3 运行检查技术条件3.1 环境：温度：25℃；相对湿度：20~60%；室内无易燃、易爆和强腐蚀性物质，无强烈的机械振动和电磁干扰。3.2 安装要求：仪器应平稳而牢固的安装在工作台上，电缆线的接触件应紧密配合，接地良好。气体管路应使用不锈钢管、铜管、聚乙烯管，禁止使用橡皮管。3.3 标准溶液3.3.1确保流动相中使用的水与有机相均符合LCMS级别要求。3.3.2 标准稀释液：混合500mL超纯水、50uL甲酸、250uL氨水溶液。混匀并超声。3.3.3标准样品储备液：Waters（p/n 700008892-4）。储备液详细参数列于表2表2 标准样品化合物样品浓度质谱信号Acetaminophen 2 ng/μL[M+H] 152.0712Not applicableCaffeine2 ng/μL[M+H] 195.0882Not applicableSulfadimethoxine 1 ng/μL[M+H] 311.0814[M-H]309.0658Verapamil 500 pg/μL[M+H] 455.2910Not applicableChloramphenicol 500 pg/μLNot applicable[M-H]321.004517-α-hydroxyprogesterone 50 ng/μL[M+H] 331.2273Not applicable3.3.4 混合标样1（5pg/uL SDM）：将100uL“标准样品储备液”与1900uL流动相A1/A2充分混合，得到“混合标样1”。3.3.5混合标样2（1pg/uL SDM）：将200uL“标准样品储备液”与800uL流动相A1/A2充分混合，得到“混合标样2”。3.4 仪器参数3.4.1 液相系统3.4.1.1分别使用乙腈、甲醇、异丙醇与含有0.2%甲酸水溶液prime系统。3.4.1.2准备流动相A与流动相B。流动相A：100uL甲酸、500uL氨水溶液与1L超纯水混合。流动相B：50uL甲酸与500mL乙腈混合。3.4.1.3使用流动相A与流动相B分别清洗流动相管理5分钟。3.4.1.4将ACQUITY UPLC BEH C18 (2.1 x 50-mm, 1.7-μm)色谱柱安装至液相系统上。3.4.1.5使用流动相B以0.1mL/min的流速冲洗系统1小时。3.4.1.6按表3与表4建立液相方法表3液相方法参数ParameterValueRun time2.50 minPressure limit low0 PSIPressure limit high15000 PSISeal Wash1 minGradient startAt injectionSolvent A1Water (+0.01% formic acid + 0.05% ammonia)Solvent B1Acetonitrile (+0.01% formic acid)表4液相梯度StepTime(min)Flow(mL/min)% A% BCurve1Initial0.80090.010.0Initial20.200.80090.010.0631.500.80030.070.0641.800.80030.070.0652.000.80090.010.0662.500.80090.010.063.4.2 质谱系统3.4.2.1依据表5设定质谱参数表5离子源参数ParameterSettingCapillary0.5 kVSampling Cone40 VSource Offset80 VSource Temperature140 °CDesolvation Temperature600 °CCone Gas100 L/hrDesolvation Gas1000 L/hr4 检查项目和方法4.1正离子分辨率模式在正离子模式下，分别进样“混合标样1”10次，每次进样10uL。针对“sulfadimethoxine”进行数据处理。要求得到表1技术指标。4.2负离子分辨率模式负离子模式下，分别进样“混合标样2”10次，每次进样10uL。针对“sulfadime