荧光或磷光.ppt

3、荧光增强法 有些分析物本身不发荧光，但却能使某种 荧光试剂的荧光发生增强，且荧光增强的程度 与分析物的浓度有着定量的关系，通过测定该 荧光试剂荧光强度的增强程度，便可间接地测 定该分析物。 淬灭剂 动态淬灭 淬灭剂与发光物质激发态分子发生相互作用 静态淬灭 淬灭剂与发光物质基态分子发生相互作用 著名的熄灭剂: 卤素离子 重金属离子 氧分子 硝基化合物 卤素离子对于奎宁的荧光有显著的熄灭作用，但对某些物质的荧光并不发生熄灭作用，这表明熄灭剂和荧光物质分子之间的相互是有选择性的。 荧光熄灭作用在荧光分析中有着降低待测物质的荧光强度的不良作用，但另一方面，我们可以利用某一物质对某一荧光物质的熄灭作用建立对该物质的荧光熄灭法检测。该法常具有更高的选择性。 1.碰撞熄灭 溶液中荧光物质分子M和熄灭剂Q相碰撞 而引起荧光熄灭。 比较速率 M＋hυ→M*(吸光) 1 M* → M＋hυ (发生荧光) k1[ M* ] M* +Q M+Q+热 k2[ M* ][Q] Stern-Volmer方程式 k：熄灭常数 [Q]：熄灭剂浓度(M) F0,F分别是熄灭剂Q不存在时及存在时的溶液的荧光强度 2. 组成化合物的熄灭 某些荧光物质溶液在加入一些熄灭剂之后，溶液的荧光强度显著降低; 随着温度的升高，荧光强度而增强。 上述情况可能是由于一部分荧光物质分子M与熄灭剂分子Q作用而生成了络合物MQ，如络合物MQ的形成是由于微弱的范德华引力的作用，则所形成的络合物并不发生荧光，且对solu的吸收并不发生任何影响。 发生荧光的物质仍为M*分子，品种并没有改变，所以荧光分子的平均寿命也没有改变，至于solu温度升高荧光强度之所以增强，可能是由于温度升高时该络合物较不稳定，较多地分解为M和Q分子的缘故。这一点可以作为这一类型熄灭不同于碰撞熄灭的标志。 如果络合物MQ的形成是由于强大的力，则络合物MQ将具有它自己的吸光特性，溶液的吸收光谱也将发生改变。 3. 转入三重线级的熄灭 E C 位 E 能 π* G D π A B CBD处于单线态的基态 EGF为第一激发单线态 虚线为激发三线态 ? 当由单线态转移至三线态时，多余的振动能在碰撞中损失掉，solu中绝大多数转入三重线级的分子在一般温度下是不会发光的，它们把多余的能量消耗于它们与其它分子的碰撞之中，因而引起荧光的熄灭 。 转入三重态的分子在低温下可由三线态重新返回到基态，在这一过程中将放出波长较长的磷光。 含溴、碘化合物、重氮、羰基、羧基及某些杂环化合物容易转变至三线态，因而易使荧光熄灭。电子自旋方向的改变系有强烈磁场的诱导作用所引起的，在原子核附近，尤其是在Br或I这样重的原子核附近，存在着强烈的磁场，所以含溴、碘的化合物容易使溶液荧光熄灭。 几乎所有会发生荧光的有机化合物都会被溶解在溶液中的氧分子熄灭剂熄灭到不同的程度。 三线态的氧分子和单线态的荧光物质分子碰撞 单线态的氧分子和三线态的荧光物质分子碰撞 4.? 发生电子转移反应的熄灭 某些熄灭剂分子与荧光物质分子相互作用时，发生了电子转移反应，即氧化－还原反应，即引起荧光的熄灭。 例：甲基蓝荧光溶液被Fe2+离子熄灭