沉默信息调节因子1（SIRT1）基因沉默诱导肝癌细胞老化及机制研究.DOC

沉默信息调节因子1（SIRT1）基因沉默诱导肝癌细胞老化及机制研究 宋春丽1，任吉华1，张祯祯2，陶颖1，陈娟1 重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室 重庆市 400016 重庆医科大学附属儿童医院感染科 重庆市 400014 [摘要] 目的 探讨慢病毒介导的SIRT1基因沉默对肝癌细胞老化的影响及机制研究。方法 通过慢病毒介导的shRNA干扰技术靶向沉默SIRT1的表达，并通过Western blot验证SIRT1基因的沉默效果。台盼蓝排斥实验检测细胞生长情况；β-半乳糖苷酶染色观察肝癌细胞有无老化；Western blot检测衰老相关基因p53和p21蛋白的变化。结果 慢病毒介导的shRNA能显著抑制细胞SIRT1的表达并且同时抑制肝癌细胞的增殖。SIRT1沉默后肝癌细胞中衰老相关的β-半乳糖苷酶染色显著增加（P0.05），并伴随衰老相关基因p53和p21蛋白表达增加。 结论SIRT1的沉默诱导了细胞老化，并同时促进p53和p21蛋白的表达，提示SIRT1基因沉默可能通过p53/p21途径促进细胞衰老。 [关键词]? SIRT1；肝癌；老化 [中图分类号]?R34 Gene silencing of SIRT1 inhibits proliferation and induces Senescence in hepatocelluar car