第一章色谱法的基本原理.pptVIP

第一章 色谱法的基本原理 ; 色谱分析法是用来进行混合物中各组分的分离和分析的一种物理化学分析方法。; 1903年，俄国植物学家Tswett 利用吸附原理分离植物色素而 发明色谱法(chromatography) 。 1941年Martin A J P和Synge R L M发明液液分配色谱、获1952年 诺贝尔化学奖。 1952年Martin A J P和James A T发明气相色谱(gas chromatography, GC) 70年代发展了高效液相色谱(High-performance liquid chromaotgraphy, HPLC)成为重要分离分析技术 80年代Jorgenson J W等的研究工作推动了高效毛细管电泳(High-performance capillary electrophoresis, HPCE)高速发展;1.1.2 色谱法分类 1、按两相所处的状态分类 气相色谱 -------- 用气体作流动相 液相色谱 -------- 用液体作流动相 由于固定相可分为固体吸附剂和涂在固体担体上或毛细管内壁上的液体固定相，故可将色谱法分为下述四类：;2、按固定相形状分类 ①柱色谱 固定相装在柱管内。它又可分为填充柱色谱和空心毛细管色谱。 GC 填充柱: 长1－10 m，? 2－4 mm 空心毛细管: 长10－100 m，? 0.1－0.5 mm LC : 长0.1－0.5 m，? 4－6 mm ②纸色谱 用滤纸作固定相，试样溶液在纸上进行展开、分离。 ③薄层色谱 将固定相研磨成粉末，再压成薄膜或涂成薄膜。样品的分离形式类似纸色谱。(纸色谱和薄层色谱又统称作平板色谱);3、按分离过程的物理化学原理分类 ① 吸附色谱 (L－S，G－S) 利用吸附剂表面对不同组分物理吸附性能的差异进行分离。 ② 分配色谱 (L－L，G－L) 利用不同组分在两相中分配系数的不同进行分离。 ③ 离子交换色谱 (L－S) 利用组分离子与离子交换剂的交换能力不同进行分离。 ④ 空间排阻色谱 (L－S) 用多孔物质对不同大小分子的阻碍作用进行分离。;1.2 色谱分离原理;k: 随K和流动相、固定相体积的变化而变化，而K是由组分及固定液的热力学性质决定的。 ;1.2.2 分离原理;1.3 色谱流出曲线; 1.峰高 色谱峰顶点与基线之间的距离，以h表示，如图中AB 2．标准偏差σ 0.607h处，拐点处，峰宽正好为2σ 3．峰面积A A＝1.065hY1/2 4．半峰宽Y1/2 Y1/2=2.354σ 5．峰底宽 Y=4σ， 拐点作切线与基线相交，相交两点，两点间距 离为峰底宽，如图中AB。σ、Y1/2、Y统称为区域宽度 ; 保留值是用来描述待测试样中各组分在色谱柱中滞留情况的物理量，通常用距离或将各组分带出色谱柱所需的载气体积（或时间）表示。在一定的固定相和操作条件下，任何一种物质都有一个固定的保留值，故组分的保留值可用于该组分的定性鉴定。 1．死时间tM 不被固定相吸附或溶解的组分从进样开始到柱后出现响应信号极大值时所需时间。对于气相色谱，常把空气（热导检测器）和甲烷（氢火焰离子化检测器）从进样到出峰的时间称为死时间。; ;5．死体积VM 不被保留的组分，即分配色谱中K=0的组分，可由死时间来确定。 VM=tM qV,c 6．保留体积VR 从进样开始到柱后出现待测组分响应信号极大值时所通过的载气体积。 VR=tRqV,c ;7．调整保留体积VR′ 指扣除死体积后的保留体积。 VR′=VR－VM 8．相对保留值r2,1 指组分2的调整保留值与组分1的调整保留值之比，是一个无因次量，只和柱温与固定相性质有关，故其可以作为一个定性指标。 r2,1也可用α表示，即，α也叫做选择因子。; 9．保留值与保留因子 间的关系;16;从色谱流出曲线可以得到以下一些信息： a．样品所含最少组分(峰个数) b．根据色谱峰的保留值可以进行定性分析 c．根据色谱峰的面积或峰高可以进行定量分析 d．根据色谱峰的位置和区域宽度可对色谱柱效能进行评价 ;1.4