富锗金针菇多糖fvp1结构的初步鉴定及其对巨噬细胞功能调节作用.pdfVIP

学 报 １６４ ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　２０１１，４２（２）：１６４－１６８ 富锗金针菇多糖ＦＶＰ１结构的初步鉴定及其 对巨噬细胞功能调节作用  闫籦姝，姚文兵 ，张　健，邹　珊，张　先，高向东 （中国药科大学生命科学与技术学院，南京２１０００９） 摘　要　从发酵的富锗金针菇（Ｆｌａｍｍｕｌｉｎａｖｅｌｕｔｉｐｅｓ）菌丝体分离纯化得到多糖 Ｆｌａｍｍｕｌｉｎａｖｅｌｕｔｉｐｅｓｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ１ （ＦＶＰ１），并对其进行结构初步鉴定和体外活性分析。利用凝胶渗透色谱（ＧＰＣ）测定相对分子质量；气相色谱法（ＧＣ）检测 单糖组成；运用高碘酸氧化Ｓｍｉｔｈ降解法、甲基化方法对多糖结构初步解析。体外分析ＦＶＰ１对小鼠巨噬细胞的活化作用。 结果显示，ＦＶＰ１是一种高度分支的多糖，相对分子质量约为１４０ｋＤ，单糖组成包括甘露糖、葡萄糖、半乳糖、盐藻糖及鼠李 糖，其物质的量比为２∶４∶５∶１∶１；ＦＶＰ１的主链结构包括１，６葡萄糖、１，６半乳糖、１，３半乳糖，并在１，３，６甘露糖少量的１，３， ４鼠李糖产生支链结构。结果发现，ＦＶＰ１能与小鼠腹腔巨噬细胞靶向性结合，并可显著促进其分泌ＮＯ。ＦＶＰ１在体外展示 了良好的免疫调节活性，具有潜在的生物学功能。 关键词　ＦＶＰ１；分离纯化；结构测定；ＮＯ；巨噬细胞 中图分类号　Ｒ２８４２；Ｒ２８５　　文献标识码　Ａ　　文章编号　１０００－５０４８（２０１１）０２－０１６４－０５ Ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｎｄａｃｔｉｖａｔｉｏｎｏｆｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓｉｎｖｉｔｒｏｏｆａｎｏｖｅｌｐｏｌｙ ｓａｃｃｈａｒｉｄｅｆｒｏｍＦｌａｍｍｕｌｉｎａｖｅｌｕｔｉｐｅｓｍｙｃｅｌｉｕｍ  ＹＡＮＹｉｓｈｕ牞ＹＡＯＷｅｎｂｉｎｇ牞ＺＨＡＮＧＪｉａｎ牞ＺＯＵＳｈａｎ牞ＺＨＡＮＧＸｉａｎ牞ＧＡＯＸｉａｎｇｄｏｎｇ ＳｃｈｏｏｌｏｆＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ牞ＣｈｉｎａＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ牞Ｎａｎｊｉｎｇ２１０００９牞Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ　ＡｎｅｗｆｒａｃｔｉｏｎｏｆＦｌａｍｍｕｌｉｎａｖｅｌｕｔｉｐｅｓｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ１牗ＦＶＰ１牘ｗａｓｓｅｐａｒａｔｅｄａｎｄｐｕｒｉｆｉｅｄｆｒｏｍ Ｆｌａｍｍｕｌｉｎａｖｅｌｕｔｉｐｅｓｍｙｃｅｌｉｕｍｗｉｔｈｓｅｖｅｒａｌｐｒｏｃｅｓｓｅｓ．Ｉｔｓｓｔｒｕｃｔｕｒａｌｆｅａｔｕｒｅｓａｎｄｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｉｎｖｉｔｒｏｗｅｒｅａｌｓｏ ｄｅｔｅｃｔｅｄ．ＴｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｍａｓｓｏｆＦＶＰ１ｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄｂｙＨＰＧＰＣ牷ｔｈｅｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｗａｓｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｔｈｅｒｅｓｕｌｔｏｆｇａｓｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ牗ＧＣ牘牷ｔｈｅｇｌｙｃｏｓｉｄｉｃｂｏｎｄｓｂｅｔｗｅｅｎｍｏｎｏｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙｐｅｒｉｏｄｉｃａｃｉｄｏｘｉｄａｔｉｏｎＳｍｉｔｈｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎａｎｄｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓ．ＦｌｕｏｒｅｓｃａｍｉｎｅｗａｓｂｏｕｎｄｗｉｔｈＦＶＰ１ａｎｄ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔａｃｔｉｖａｔｅｄｃｅｌｌｓｏｒｔｉｎｇ牗ＦＡＣＳ牘ｗａｓｕｓｅｄｔｏａｎａｌｙｚｅｔｈｅｂｉｎｄｉｎｇｏｆＦＶＰ１ＦＬＡｔｏｐｅｒｉｔｏｎｅａｌｍａｃｒｏｐｈａ ｇｅｓ．Ｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｍａｓｓｉｓａｂｏｕｔ１４０ｋＤ．ＦＶＰ１ｃｏｎｓｉｓｔｓｏｆｍａｎｎｏｓｅ牗Ｍａｎ牘牞ｇｌｕｃｏｓｅ牗Ｇｌｃ牘牞ｇａｌａｃｔｏｓｅ牗Ｇａｌ牘牞ｆｕ ｃｏｓｅ牗Ｆｕｃ牘ａｎｄｒｈｏｍｎｏｓｅ牗Ｒｈａ牘ｉｎａｍｏｌａｒｒａｔｉｏｏｆ２牶４牶５牶１牶１．ＩｔｗａｓｆｏｕｎｄｔｈａｔＦＶＰ１ｉｓａｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄｐｏｌｙｓａｃ ｃｈａｒｉｄｅｗｉｔｈａｍａｉｎｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｏｆ１牞４Ｇｌｃ牞１牞３Ｇａｌ牞１牞３Ｆｕｃ牞１牞６Ｇａｌ牞１