iii 型分泌系统抑制剂对铜绿假单胞菌pao1 毒性因子的影响.pdfVIP

微生物学通报 Nov. 20, 2014, 41(11): 2318−2324 Microbiology China © 2014 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.140111 研究报告 III 型分泌系统抑制剂对铜绿假单胞菌PAO1 毒性 因子的影响 1Δ 2Δ 2 2 1 1* 2* 顾玲玲 吴小刚 袁小琛 方力为 张成芳 陈新 YANG Ching-Hong (1. 213164) (2. Department of Biological Sciences, University of Wisconsin-Milwaukee, Wisconsin 53211, USA) 摘 要：【目的】进一步研究III 型分泌系统(Type III secretion system, TTSS)抑制剂对条件致 病菌Pseudomonas aeruginosa PAO1 的TTSS 相关蛋白、鞭毛和纤毛等主要毒性因子的影响， 评估TTSS 抑制剂的防治效果及潜在风险。【方法】构建TTSS 效应蛋白合成基因exoY 和exoT 转录报告质粒 pAT-exoY 、pAT-exoT ，并将其转入菌株 PAO1 中。菌株 PAO1(pAT-exoY) 、 PAO1(pAT-exoT) 与TTSS 抑制剂共同培养后，检测exoY 和exoT 的表达。通过SDS检 测TTSS 抑制剂对鞭毛结构蛋白 FliC 的影响。将PAO1 单菌落穿刺接种于含有 TTSS 抑制剂 的1%琼脂糖平板，观察细菌纤毛介导的蹭行运动(Twitching motility) 。【结果】转录报告实验 结果表明4 个TTSS 抑制剂可显著抑制exoY 和exoT 的转录；化合物TS52 、TS53 和TS94 虽 不影响胞内TTSS 针状顶端结构蛋白PcrV 的产量，但可抑制PcrV 蛋白的胞外运输。化合物 TS53 可降低鞭毛结构蛋白FliC 的产生。另外，化合物TS52 、TS53 和TS88 可降低菌株PAO1 的蹭行运动能力，但 TS94 可提高菌株 PAO1 的这种运动能力。【结论】TTSS 抑制剂除通过 抑制TTSS 表达外，还可能通过影响其它毒性因子如鞭毛的合成、IV 型分泌系统介导的蹭行 运动等方式影响菌株PAO1 致病性。 关键词：Pseudomonas aeruginosa ，抑制剂，III 型分泌系统，毒性因子 Regulation of type III secretion system inhibitors on virulence factors of Pseudomonas aeruginosa PAO1 GU Ling-Ling1Δ WU Xiao-Gang2Δ YUAN Xiao-Chen2 FANG Li-Wei2 ZHANG Cheng-Fang1 CHEN Xin 1* YANG Ching-Hong2* (1. School of Pharmaceutical and Life Sciences, Changzhou University, Changzhou, Jiangsu 213164, China) (2. Department of Biological Sciences , University of Wisconsin-Milwaukee, Wisconsin 53211, USA) Abstract: [Objective] To study the effect of type III secreti