实验十三主要病原菌认识（一）.docVIP

实验十三 主要病原菌的认识（一） 目的要求 认识结核分枝杆菌、布氏杆菌、炭疽杆菌、猪丹毒杆菌和多杀性巴氏杆菌的形态染色特性和培养特性。 操作步骤 一、结核分枝杆菌 取培养物抹片（如没有培养物可用卡介苗代替）、干燥、火焰固定，用齐一尼氏法作抗酸染色（方法见实验二），干后镜检观察。 （一）形态染色特性 本菌为革兰氏阳性细长或微弯杆菌，牛型比人型短而粗，禽型具多形性。无芽胞、无荚膜，不能运动，用齐一尼氏法作抗酸染色，镜检，红色细菌为抗酸菌，其他细菌为兰色。 （二）培养特性 本菌营养要求高，生长缓慢，需2～6周才能发育好，在甘油琼脂上形成干燥颗粒状，乳白色不透明叠起的菌落。 二、布氏杆菌 布氏杆菌的病料最好取新鲜流产胎儿的胃内容物，或用羊水、胎盘的坏死部分，阴道分泌物等，必要时也可取乳汁和尿进行检验。但乳汁和尿因含水较多，最好先用离心法沉淀，取其沉淀物进行镜检，分离培养或接种豚鼠。 取上述病料涂片（如无病料可用布氏抗原代替），用鉴别染色法着染后再进行镜检观察。 鉴别染色法常用以下两种： （二）科兹洛夫斯基法 具体方法依次为：涂片、自然干燥、火焰固定，用2％沙黄（即番红花红）水溶液加温染色，出现气泡为止（约1.5分钟），充分水洗1～2分钟，再用1％孔雀绿水溶液染色0.5～1分钟（亦可用美兰液代替孔雀绿），水洗、干燥、镜检。 本菌呈红色，其他菌呈绿色（最好40分钟内镜检，经久则红色褪去