IL12重组载体的抗肿瘤作用.docVIP

　　IL12重组载体的抗肿瘤作用 【关键词】 白细胞介素12 遗传载体 抗肿瘤药 综述 　　细胞因子疗法为临床治疗肿瘤提供了一种安全可行的方法，在目前肿瘤治疗中占有一定地位，已经展示出良好的应用前景。在目前发现的细胞因子中，白细胞介素12（IL12）是对体内免疫活性细胞诱导和调节作用最强、范围最广的一种细胞因子，是最有效的抗肿瘤细胞因子之一。由于直接注射IL12的副作用，介导IL12基因转移进行肿瘤基因治疗是近年的研究热点。近年来，其重组载体被越来越多地应用于临床，使它的作用更好地得到了发挥。本文就IL12的分子结构特征、生物学功能、抗肿瘤作用及IL12重组载体应用的研究作一综述。 　　1 IL12的分子结构特征 　　IL12主要是由单核细胞、巨噬细胞、树突状细胞等抗原提呈细胞产生的一种异二聚体细胞因子，永生化的B细胞、CD4+细胞、中性粒细胞和肥大细胞等也可产生IL12[1]。IL12组成的两个亚基P40和P35分别由两个基因编码，单独的P40和P35亚基均不能与IL12受体结合。P35在体内普遍表达，而P40的表达受各种刺激因素的调控，只有两个基因共同表达才能组成有活性的IL12，游离的P40的二聚体蛋白是IL12的天然抑制物。所以，在IL12的基因治疗中，近年来一般将P35和P40融合连接成单链基因片段，以保证二者的均衡表达。IL12有种族特异性，人IL12在鼠中活性很小，鼠IL12在人中则有活性，人与鼠IL12亚基氨基酸序列的比较显示，P40亚基比P35亚基具有更高的保守性，P40亚基序列一致性为70%，相似性为79%；P35亚基序列一致性为60%，相似性为71%[2]。 　　2 IL12的生物学功能 　　2.1 IL12对T细胞和NK细胞的作用 　　IL12可明显刺激静止或激活的外周血T细胞、NK细胞分泌IFNγ，IFNγ与IL12有协同作用，但对于静止的细胞需要辅助细胞的参与。IL12一方面能诱导T细胞和NK细胞产生多种细胞因子，促进细胞毒性淋巴细胞增殖和功能的活化；另一方面在和肿瘤抗原的共刺激下，还能诱导特异性杀伤性T细胞（CTL）的产生，该细胞被认为是杀瘤作用最强的细胞。已发现IL12能促进穿孔素和颗粒酶的表达，增加胞浆内颗粒的产生，上调细胞表面表达多种黏附分子和细胞因子受体[3]。 　　2.2 IL12对Th1/Th2的调节 　　IL12促进Th细胞向Th1细胞分化，不但直接作用于Th1细胞和其前体并产生Ⅰ型细胞因子，如IL2、IFNγ和淋巴毒素（LT）等，还可以在肿瘤坏死因子(TNFα)和IL1协同作用下间接通过T细胞和NK细胞产生TNFγ而实现[4]。在人和鼠，已证明IL12是Th1产生的必需因子，能诱导早期辅助性T细胞分化为Th1，并促进Th1的增殖。在体外当用过敏原作用于CD4+细胞时，导致其生成Th2型细胞；当有IL12存在时，则生成Th1型细胞，分泌IFNγ而不分泌IL4。因此，IL12和IL4作用于CD4+细胞分别支持Th1和Th2细胞的分化[5]。 　　3 IL12的抗肿瘤作用 　　大量动物实验和临床研究表明，IL12能够明显抑制肿瘤的生长和转移，延长荷瘤动物的生存时间。但对IL12抗肿瘤作用及其在不同肿瘤中的作用机制各家报道不同。 　　3.1 IL12介导的T细胞参与抗肿瘤作用 　　IL12不仅可抑制新生肿瘤的生长，而且还可使已存在的肿瘤消退，且其抗瘤活性依赖于剂量。KNUTSON等在HER2/neu抗原提呈T细胞的体外研究中发现，IL12以量效依赖的方式恢复抗原提呈的增殖。p776790特异性T细胞在IL12和IL2刺激后更加容易与抗原发生反应，从而发生增殖反应和分泌细胞因子(IFNγ和TNFα)，这些结果都提示IL12在体外恢复和保持抗原提呈CD4+T细胞中发挥着重要的作用。同时也为CD4+T细胞在肿瘤过继治疗中的应用提供了理论依据[6]。利用重组卡介苗和鼠IL12增加Th1型细胞因子(包括IFNγ和IL12)的分泌，诱导瘤内CD4+/CD8+T细胞和NK细胞的浸润，从而可抑制C3H/HeN小鼠体内肿瘤的增殖。这种抗肿瘤的效应与Th1淋巴细胞和NK细胞介导的细胞毒性免疫反应相关[7]。 　　3.2 IL12通过提高NK细胞活性的抗肿瘤作用 　　在体外，IL12可明显增加人外周淋巴细胞 (PBMC)和NK细胞的活性。可纠正各种实体肿瘤病人的PBMC中NK细胞活性缺陷，在这些病人中用IL12协同IL2，可增加对NK细胞敏感的和不敏感的肿瘤细胞的细胞毒作用。在抗体包被的肿瘤细胞和IL12的双重刺激下，NK细胞可分泌不同效能的免疫