南方根结线虫RNAi胚致死效应基因的筛选与功能鉴定.pdfVIP

摘要 根结线虫是一种极难防治的世界性分布的土传病害，每年可给农业造成约 1000亿美元的损失，己然成为制约我国蔬菜种植业可持续发展的问题之一。由 于根结线虫体积小，不能人工培养，世代长等难于进行体外与宿主的相互作用方 面的研究，进展一直很缓慢。1998年在秀丽小杆线虫(Caenorhabditis elegans) 上发现了RNAi沉默现象，并于同一年完成全基因组测序，人们对C．elegans的 关注度越来越高。随着RNAi机制的明确和应用技术的逐渐成熟，大规模、高通 究根结线虫服务，将大大推动相关技术的发展。本文利用生物信息学技术对根结 线虫的ESTs库和C．elegans的全基因组蛋白库进行了比对，得到一批有用的数据， 为大规模确定植物寄生线虫基因功能奠定了基础。主要研究结果如下： 1．利用温室条件，改进高效培养和收集根结线虫J2幼虫的方法，为后续大 规模使用线虫材料提供了保障。实验证明采用改进的贝尔曼漏斗法，把纱布换成 60目筛网，在筛网上铺一层面巾纸，可以使线虫通过而把杂质隔离开，能够最 大程度地减少线虫收集的损失。 2．采用生物信息学分析鉴定