川穹嗪对大鼠心肌肥大JAKSTAT通路作用.docVIP

　　川穹嗪对大鼠心肌肥大JAKSTAT通路作用 【摘要】 目的 了解川穹嗪对大鼠心肌肥大JAKSTAT通路的影响。方法 建立心肌肥大动物模型，40只大鼠随机分为4组，每组10只，分别为血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组(给予AngⅡ 36 mg·kg-1·d-1)、AngⅡ加川穹嗪组(给予AngⅡ 36 mg·kg-1·d-1，川穹嗪50 mg·kg-1·d-1)、AngⅡ加PBS组(给予AngⅡ 36 mg·kg-1·d-1，PBS 50 mg·kg-1·d-1)、对照组(给予生理盐水36 mg·kg-1·d-1)，计算心肌肥大指数。培养、鉴定新生大鼠心肌细胞，每天分别给予AngⅡ 1×10-7 mol/L(AngⅡ2组)、AngⅡ 1×10-7 mol/L+川穹嗪1×10-4 mol/L(AngⅡ加川穹嗪2组)，以不加药物作为对照2组，培养7 d，应用RTPCR方法检测各组大鼠心肌细胞心房利钠肽(ANP)相对水平，Z) on JAKSTAT signal transduction in rats yocyte hypertrophy. Methods A cardiomyocyte hypertrophy (CH) model ade in 40 Z 50 mg·kg-1·d-1; the third, Ang Ⅱ 36 mg·kg-1·d-1 and PBS 50 mg·kg-1·d-1; and the control, saline 36 mg·kg-1·d-1. Myocardial hypertrophy index (MHI) ol/L; the second, Ang Ⅱ 1×10-7 mol/L and TMZ 1×10-4 mol/L; and the control, no medicine given. The relative level of of atrial natriuretic peptide olecules analysed by Z group decreased (q=7.53,Plt;0.01). The differences of the expressions of pJAK1, pJAK2 and pSTA in AngⅡgroup,before and after SMZ aided, yocyte hypertrophy by interfering JAKSTAT signal transduction. 　　[KEY yocytes, cardiac; Hypertrophy; Angiotensin Ⅱ; Signal transduction; Tetramethylpyrazine 　　心肌肥大是血流动力学负荷增加使心脏产生的长期反应，涉及到以心肌细胞体积增大为特征的重塑过程，是启动心力衰竭一个病理过程[1]。近年来研究显示，有许多信号通路在心肌肥大和心力衰竭过程中起重要作用，其中JAKSTAT通路在心脏疾病发病机制中的作用倍受关注[2]。人们对这一通路进行的研究显示，许多细胞因子及非免疫性生物化学递质都能激活JAKSTAT信号通路，从而启动相应的基因转录直接激活心肌肥大(代偿性)和细胞生存相关基因[3]。天然四甲基吡嗪又名川穹嗪,为中药川穹的主要有效成分,具有改善心功能和血流动力学功能作用[4]。川穹嗪治疗心血管病方面研究目前仅限制在细胞水平，本文研究川穹嗪与心肌肥大JAKSTAT通路之间的联系，现将结果报告如下。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　成年EM/F12细胞培养基购自Gibco公司;小牛血清(BS)购自杭州四季青生物制品有限公司;抗体：兔抗人磷酸化JAK/STAT一抗购自美国Santa Cruz公司;HRP偶联或荧光二抗购自Amersham公司(Buckinghamshire, UK)。本文所用引物均由上海Sangon公司合成。PCR引物序列为：ANP正义链：5′GGCTCCTTCTCCAT2CACCAA3′,反义链： 5′TGTTATCTTCGGTACCG3′,产物大小458 bp。总RNA抽提试剂Trizol购自Gibco BRL公司，RTPCR试剂盒购自Promega公司。 　　1.2 方法 　　1.2.1 建立心肌肥大动物模型 将40只成年EM培养液稀释，并加入0.1 mol/L BRDU以抑制非心肌细胞的增殖，然后将细胞均匀地接种于25 mL培养瓶中，置于37 ℃,含体积分数0.05 CO2培养箱中培养2 d，弃原液，用无血清DMEM液洗2次，用含体积分数0.15胎牛血清的DMEM培养2 d。分为4组，各10例。①对照2组：加入培养液5 mL;②AngⅡ2组：加入AngⅡ 0.5 μg，培养液