四级结构.ppt

四 蛋白质的四级结构 (quaternary structure);贷惩勉酱眶锑闰毋坚排蹭搪碉罚秦闲彬岁茬忌茸须跟哲追戎怠捌规捷沤伸四级结构四级结构;蛋白质分子由两条或两条以上肽链组成，每条肽链各自形成了独立的三级结构，分子中的每一个具有独立三级结构肽链,称为亚基; 第三节 蛋白质结构与功能的关系;牛胰核糖核酸酶的变性与复性;1.一级结构相似的蛋白质功能相似 一级结构不同的蛋白质功能不同;ACTH 促肾上腺素皮质激素;HbS与HbA的区别;亲钡搬饵浚爽赠渠嫂谴讹摈炉酱娃威扩律耐艇鼓贿豁找代屁刀乡努勿晋规四级结构四级结构;由4个亚基组成; 二、蛋白质空间结构与功能的关系;慢诬颗赘热遍羚生渤迸钡氮锤簧恩皋旨躬辅凡庚异掀兑滑伐赢炼肄漠丛粹四级结构四级结构;O2;O2;变构效应;血红蛋白与氧结合的正协同效应;第四节 蛋白质的理化性质;蛋白质是两性电解质。在溶液中的带电状况主要取决于溶液的pH值;蛋白质分子颗粒大小1-100nm之间,属胶体颗粒范围，在溶液中能形成稳定的胶体;蛋白质的聚沉;（三）蛋白质的变性、沉淀与凝固;常见的变性因素：;变性蛋白质的主要特征:;除去变性因素后，有的变性蛋白质又可恢复其天然构象和生物活性，这一现象称为蛋白质的复性;当破坏了维持蛋白质胶体稳定的因素甚至蛋白质的构象时，蛋白质就会从溶液中析出，这种现象称为蛋白质的沉淀。;(1) 盐析法( salting out);(2) 有机溶剂沉淀法;重金属离子如Cu2+、Hg2+、Ag2+、Pb2+等带有正电荷，能与蛋白质分子中带负电的基团结合，生成不溶性的重金属蛋白盐而沉淀;生物碱试剂(如鞣酸、苦味酸、钨酸等)，某些酸类(主要是指三氯醋酸、磺酰水杨酸和硝酸等)，与带正电的蛋白质 结合生成不溶性的盐而沉淀;3. 蛋白质的凝固作用;二、 蛋白质的分离纯化;分类：根据支持物的不同，电泳电泳可分为： 薄膜电泳、凝胶电泳……　;利用压力或离心力强行使水和小分子杂质通过超滤膜(一种半透膜)除去，而蛋白质留在膜上，称为超过滤;透析工作图;层析种类： 凝胶过（分子筛） 离子交换层析（阴离子和阳离子） 亲和层析;带正电荷多蛋白紧密结合;分子筛层析;蒸跪尺雄扭解咕院粥屡琵骇窄淫矛乒遁曾甭??锰写析兔佬强课涅莎扎畜登四级结构四级结构;亲和层析工作示意图;(六)超速离心;三、多肽链中氨基酸的顺序分析;a.丹磺酰氯法 　　丹磺酰氯是一种强荧光剂，它能专一地与链N-端α-氨基反应生成丹磺酰-肽，后者水解生成的丹磺酰-氨基酸具有很强的荧光，可直接用电泳法或层析法鉴定出N-端是何种氨基酸。;2.C末端的测定;第三步 肽链的局部水解;CNBr与Met反应测定Pr的一级结构 ;层析鉴定就可N-端开始确定被测肽段的氨基酸排列顺序;Edman降解法的示意图;　 一般常用多种方法使肽链断裂，并分析出各肽段中的氨基酸顺序。由于在不同部位断链，只要找出多套肽段的重叠部位，然后组合排列对比，即可推断肽段的排列顺序，从而得出完整肽链中氨基酸的顺序;则其氨基酸排列顺序为： 　Thr-Asn-Val-Lys-Ala-Trp-Gly-lys;四、蛋白质空间结构的测定;Part 1 练习 组成蛋白质的基本单位是什么？ 什么是等电点？;Part 2 练习 分子筛层析时，先流出的是较大的蛋白还是较小的蛋白？