海藻酸钠固定酵母细胞如何获得成功.pdfVIP

2009年 第44卷 第 11期 生 物 学 通 报 35 海藻酸钠固定酵母细胞如何获得成功 王 源 丁 梅 (I江苏省扬州中学教育集 团树人学校 江苏扬州 225001 2江苏省扬州市弘扬 中学 江苏扬州 225002) 摘要 主要针对 《生物技术实践》中 “酵母细胞 的固定化 ”这一课题 ，探讨 了实验原理和 实 验操作过程 中的几个注意点：控制好配制海藻酸钠溶液的火候 、浓度 ，调节海藻酸钠与酵母细 胞混合液浓度 ．从而不出现蝌蚪状凝胶珠 ，如何不 出现漂浮在 CaC12溶液上的凝胶殊等 ，并针 对该实验 结果 的评价进 行 了讨论 关键词 海藻酸钠 酵母细胞的固定化 包埋 法 实验操作 实验评价 中国图书分类号 ：Q93-33 文献标识码 ：B 普通高 中课程标准实验教科书生物学选修 1 验成败的关键步骤 配置海藻酸钠溶液 。加热使 《生物技术实践》(人教版 ，2007年第 2版)，专题 4 海藻酸钠溶化是操作 中重要的一环 ．涉及到实验 课题 3：酵母细胞的固定化，本课题使用包埋法来 固 的成败。教材提示是要用小火或者间断加热 ，反复 定细胞 ，即将微生物细胞均匀地埋在不溶于水的多 几次 ．直到完全熔化。在实验操作 中，教师要提醒 孔性载体中。实验选用海藻酸钠作载体包埋酵母细 学生按照教材的提示进行 ，不然会发生焦糊现象 。 胞。实验看似简单 。但高中生甚至部分中学教师都 笔者 多次实际操作发现酒精灯上隔石棉 网加热 ， 不容易做好，在实验操作过程中出现很多问题。笔 匀速搅拌基本不会发生焦糊现象，而且需要时间 者参加省级新课程培训时，接受过该实验的培训 ， 略长 ．为节省时 间可选用 电炉加热 ，加快熔化 ，但 也指导了2届高二选修班的学生完成过该实验 ，学 一 定要间断加热 ，可 以用试 管夹移动烧杯 。完全熔 生兴趣浓厚 ，实验效果 良好，取得成功。关于这个实 化的海藻酸钠成半透 明状，最好要无颗粒无气泡， 验谈几点个人体会 ，希望能对中学师生有所帮助 。 类似于平常家庭中冲调好食用 的藕粉。 1 实验原理要在实验前让学生知道 海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量 。如 海藻酸钠是应用最广泛的水溶性海藻酸盐 。 果海藻酸钠浓度过高 ，将很难形成凝胶珠 ；如果浓 海藻酸钠遇到钙离子可迅速发生离子交换 ，生成 度过低 ，形成的凝胶珠所包埋 的酵母细胞的数 目 凝胶 。利用这种性质 ，将海藻酸钠溶液滴入含有钙 少 ，影响后续实验效果 。教材提示是 0．7g海藻酸 离子 的水溶液 中可产生海藻酸钙胶球 。本实验便 钠，加入 10mL蒸馏水 ，边加热边搅拌 ，直至完全熔 是将酵母细胞与海藻酸钠溶液混匀后 ，通过注射 化 ．用蒸馏水定容至 10mL。实际操作 中，很多学生 器或相似 的滴注器将上述混合液滴人 CaCI，溶液 忘记定容 ，也有教师认为不需要定容。其实在加热 中，Ca从外部扩散进入海藻酸钠与细胞混合液 搅拌的过程中．蒸馏水会蒸发 。加热时间越长失去 珠 内，使海藻酸钠转变为不溶于水 的海藻酸钙凝 的蒸馏水越多．所以加热熔化结束后一定要定容 ，不 胶 ，由此将酵母细胞包埋在其中。 然浓度肯定偏大 ，影响后续步骤中凝胶珠的形状。 本课题教材 中并未提及这～原理 ．教师用书 2．2 控制海藻酸钠溶液与酵母细胞混合时的温 中也没有补充 ，教师不查资料就无法解释给学生。 度 ，保证酵母细胞的活性 海藻酸钠溶液与酵母 学生不知道实验原理 ，就不能理解实验各步骤 的 细胞混合，一定要将溶化好的海藻酸钠溶液冷却 目的，比如