罗尔斯顿菌-生态与农村环境学报.PDF

－ 生态与农村环境学报　 ２０１４， ３０ （６）： ７６１ ７６７ 　 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｅｃｏｌｏｇｙ ａｎｄＲｕｒａｌ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ 罗尔斯顿菌（Ｒａｌｓｔｏｎｉａ ｓｐ．）Ｔ６对三氯吡啶醇污染土壤的 修复及能完全矿化毒死蜱工程菌株的构建 １ １，２ １ １① 张　 扬 ， 王　 飞 ， 黄　 彦 ， 崔中利 　 （１ 南京农业大学生命科学学院／ 农业部农业环境微生物工程重点实验 室， 江苏 南京　 ２１００９５； ２ 江西农业大学生物科学与工程学院， 江西 南昌　 ３３００４５） － － － 摘要： 以毒死蜱降解中间代谢产物３，５，６ 三氯 ２ 吡啶醇（ＴＣＰ）高效降解菌罗尔斯顿菌（Ｒａｌｓｔｏｎｉａ ｓｐ． ）Ｔ６为材 料，研究其在土壤中对ＴＣＰ 的降解特性。 结果表明，温度、接菌量和初始底物浓度对ＴＣＰ 的降解都有影响，Ｔ６菌 ８ －１ × 株降解ＴＣＰ 的最适温度为３０ ℃，当土壤含菌量〔以菌落形成单位（ＣＦＵ）计〕小于１０ １０ ｋｇ 时，降解率随着含菌 ８ －１ × 量的增加而提高，当含菌量超过 １０ １０ ｋｇ 时，降解率不再提高。 降解率随着ＴＣＰ 初始浓度的增加而降低，当 －１ －１ ＴＣＰ初始浓度为５０～１００ ｍｇ ·ｋｇ 时，６ ｄ 内可将５０ ｍｇ ·ｋｇ ＴＣＰ 降解８０％。 利用基因工程手段，将来源于寡养 － 单胞菌（Ｓｔｅｎｏｔｒｏｐｈｏｍｏｎａｓ ｓｐ． ）ＤＳＰ １的甲基对硫磷水解酶基因（ｍｐｄ）插入菌株Ｔ６基因组１６ＳｒＲＮＡ基因中，成功 － － 构建一株可彻底矿化毒死蜱的重组工程菌株Ｔ６ ｍｐｄ。 生长试验结果表明罗尔斯顿菌Ｔ６ ｍｐｄ 和Ｔ６ 的生长特性 － － 基本一致。 对Ｔ６ ｍｐｄ菌株降解毒死蜱的特性研究结果表明，在ＬＢ培养基中，Ｔ６ ｍｐｄ对毒死蜱的水解效率与 －１ － － ＤＳＰ １基本一致，但在基础盐（ＭＳＭ）培养基中，Ｔ６ ｍｐｄ在６０ ｈ 内对５０ ｍｇ ·Ｌ 毒死蜱的降解率仅为３６％，显著 ８ －１