白膜法手工富集血小板与单供者机采血小板质量对比研.docVIP

　　白膜法手工富集血小板与单供者机采血小板质量对比研 【摘要】 本研究旨在对比白膜法手工富集血小板与单供者机采血小板的质量差异。将15袋（2单位/袋，400 ml全血制备）白膜法手工富集血小板和15单位单供者机采血小板在（22 ±2 ）℃条件下振荡保存。在制备后1小时检测血小板浓度、体积、白细胞残留量、红细胞残留量；分别在血小板保存的0、1、2、3、4、5天检测平均血小板体积、pH值、乳酸浓度、血小板膜表面CD62p表达率、凝血酶激活后CD62p再表达率、血小板低渗休克反应。结果显示：二组的血小板得率、红细胞残留量、白细胞残留量都分别达到相应的国家质量标准，但在达到相同血小板计数的情况下，白膜法手工富集血小板组的红细胞残留量、白细胞残留量明显高于单供者机采血小板组（p＜0.01）；二组的乳酸、血小板膜表面CD62p表达率均随保存时间延长而升高；二组间比较，白膜法手工富集血小板组CD62p表达率在保存0-5天均高于单供者机采血小板组（p＜0.01）。二组的pH值、凝血酶激活后CD62p再表达率均随保存时间的延长而下降；二组间比较，2-5天白膜法组pH值明显低于单供者机采血小板组（p＜0.01），0-5天白膜法组CD62p再表达率明显低于单供者机采血小板组（p＜0.01）。单供者机采血小板组血小板低渗休克反应水平在0-5天无明显变化，而白膜法手工富集血小板组血小板低渗休克反应水平随保存时间的延长而下降，保存1-5天时均明显低于单供者机采血小板组（p＜0.01）。结论：白膜法手工富集血小板质量低于单供者机采血小板质量，其制备工艺有待改进和优化，以降低红细胞、白细胞残留量和活化血小板水平，提高其血小板质量。 【关键词】 单供者机采血小板 Qualitative parison beted to pare the difference of quality bete, residual leukocyte and residual erythrocyte in tined after preparation for 1 hour. Mean platelet volume, pH value, hypotonic shock response (HSR) , CD62p expression and CD62p reexpression of platelet e, ized further in order to reduce residual leukocyte, residual erythrocyte and activated platelet yields, as prove the quality of BCPC. Key atol 2007; 15(4):878-881 随着全自动血细胞分离机在国内的普及推广，我国单供者机采（单采）血小板的用量逐年上升，而手工白膜采集的血小板在临床的应用越来越少，造成手工采集全血中血小板资源的严重浪费。而在欧洲，手工采集的血小板始终占血小板用量的大多数。 国家卫生部决定自2006年9月30日起，一律停止有偿单采血小板。因此临床供应的单采血小板数量显著下降，手工制备浓缩血小板的用量稳步上升。目前国内多数血站提供的浓缩血小板是采用白膜法手工制备，我们对白膜法手工富集血小板与单采血小板的质量与保存效果进行对比研究，为改进手工采集浓缩血小板工艺和建立全面质量标准提供依据。 主要仪器与应用试剂 MCS+血细胞分离机和995E采集保存袋（美国血液技术公司产品），四联血液采集保存袋（广州华南医疗用品有限公司产品），Heraeus 6000i 低温离心机（德国贺利氏仪器公司产品），MEK6180 K 型血细胞计数仪（日本Nikonkohden 公司产品）,VITROS 950干化学全自动生化分析仪(美国强生公司产品)，FACSCalibur 流式细胞仪(Becton Dickinson产品) 和CellQuest 分析软件，APACT2聚集仪（四川美生实业有限责任公司产品），血小板振荡保存箱（美国Forma公司产品），HI9321 微电脑型pH 计(Hanna 公司产品)，37℃恒温水浴箱（北京长安科学仪器厂产品），Negeotee 血细胞计数池（Hausser Scientific Horsham, USA产品）,普通光学显微镜（日本Olympus公司产品）。抗CD61 抗体: PerCP 标记(Becton Dickinson产品)；抗CD62p 抗体: RPE 标记( PharMingen公司产品)；人凝血酶: 0.5 U/ ml (Sigma公司产品)； GlyProArgPro 乙酸盐( GPRP) : 25 mmol/ L ( Sigma 公司产品)；改良TBS缓冲