离子液体顶空单滴微萃取分析中药中的高沸点挥发性成.docVIP

　　离子液体顶空单滴微萃取分析中药中的高沸点挥发性成 【摘要】 建立了分析中药中高沸点挥发性成分的离子液体顶空单滴微萃取液相色谱法，并用于复方鲜竹沥液中愈创木酚的含量的测定。采用改进的悬滴装置，增大了液滴与微量进样器针尖处塑料套管的接触面积，使离子液体的液滴达12 μL，提高了液滴的稳定性及方法的灵敏度。考察并优化了影响萃取的因素，确定了萃取条件：以12 μL 1丁基3甲基咪唑基六氟磷酸盐([PF6])为悬滴，在5 mL含36%(in的条件下，顶空萃取30 min，萃取后直接将液滴吸回微量进样器，进行HPLC检测。愈创木酚在0.05～1.6 mg/L范围内线性关系良好(r=0.9997); 检出限为0.39 μg/L，愈创木酚的加样回收率为97.6%，RSD为2.5%。本方法操作简单、定量准确，样品前处理简单，成本低，无污染。 【关键词】 离子液体; 顶空单滴微萃取; 高沸点挥发性成分; 复方鲜竹沥液; 愈创木酚 　1 引 言 　　分析中药及其制剂中常含有的一些具有重要活性的挥发性成分，常需采用一定的样品前处理方法进行提取分离及纯化，再用色谱法测定。传统的提取方法[1]有溶剂萃取法、水蒸气蒸馏法、挥发油提取法和超声萃取法等。另外还有一些新方法，如顶空气相色谱法[2]和固相微萃取技术[3]等。但这些方法均存在一些缺点，如挥发油提取法中有机溶剂用量大，提取时间长，操作步骤繁杂，易造成挥发性成分的损失等;固相微萃取则存在探头寿命短，成本较高，交叉污染等问题。单滴微萃取(SDME)[4]是近年来发展起来的一种萃取装置简单、成本低、溶剂用量少、操作简便快速的样品前处理技术，与色谱技术联用方便，应用广泛。但SDME也存在如萃取溶剂多为有机溶剂， 萃取液滴体积小， 易挥发， 不易高温萃取， 萃取维持时间短等缺点。 　　离子液体是一种新型溶剂，具有非挥发性、热稳定性强、粘度和密度大等特点[5～7]，用作SDME的萃取剂，避免了传统有机溶剂易挥发，萃取液滴体积小，不易长时间高温萃取等缺点。Manzoori等[8]将SDME的微量进样器针头处的塑料套管下端用热的铜线烫出4个凹槽，使离子液体[C4MIM][PF6]液滴增大到7 μL，用于水样和食物中Pb的测定。本研究进一步改进了悬滴装置，将微量进样器下端的塑料套管用火烧制成一端凸起的圆饼状，增大了悬挂的离子液体与套管的接触面积，将液滴[PF6]增加至12 μL，提高了液滴的稳定性及方法的灵敏度， 顶空单滴微萃取可在高温下较长时间地悬挂较大体积的液滴。利用所建的离子液体顶空单滴微萃取液相色谱法测定了复方鲜竹沥液[9]中高沸点的有效成分愈创木酚的含量，避免了采用繁琐费时的挥发油提取法或传统的溶剂(乙醚)萃取法[10～12]，操作简单快速，可直接进样分析测定，结果准确，环境友好。改进的离子液体顶空单滴微萃取方法有望应用于药物中的高沸点挥发性成分的测定。 　　2 实验部分 　　2.1 仪器与试剂 　　Series 200 LC pump高效液相色谱仪(PERKIN ELMER公司)，UV检测器(Applied Biosystems 785A);HICROLITER#702微量进样器(25 μL，美国Hamilton公司);圆柱形样品瓶(6.4 cm×1.6 cm);圆柱形搅拌子(1.0 cm×0.5 cm)。 　　愈创木酚(批号：111510200502，中国药品生物制品检定所);复方鲜竹沥液(批号：0901004，0903021，0904029，江西汇仁药业有限公司);1丁基3甲基咪唑基六氟磷酸盐([PF6]，上海成捷化学有限公司);冰醋酸(天津市北宏试剂厂)。甲醇为色谱纯，水为重蒸水。 　　2.2 顶空单滴微萃取(HSSDME) 　　顶空单滴微萃取装置如图1。微量进样器下端的塑料套管(0.6 mm i.d，1 mm o.d)烧制成一端凸起的圆饼状(3.5 mm o.d)，以增大悬挂的离子液体与套管的接触面积，从而增大液滴体积及其稳定性。 图1 顶空单滴微萃取装置示意图 　　取1.8 g NaCl，5 mL样品液及搅拌子放入带聚四氟乙烯塞的样品瓶中，用25 μL微量进样器精密吸取12 μL [PF6]，穿透聚四氟乙烯塞后，在进样器针头装上改进后的塑料套管，密封。将离子液体轻轻推出，使其在距液面1 cm处形成液滴，在萃取温度80 ℃、搅拌速度1000 r/min的条件下，顶空萃取30 min，萃取后直接将液滴吸回，进样HPLC分析检测。 　　2.3 色谱条件 　　Kromasil C18色谱柱(150 mm×4.6 mm， 5 μm)。流动相：1%冰醋酸甲醇(70∶30, V/V);流速：1.0 mL/min;检测波长：274 nm;柱温：室温。 　　2.4 对照品溶液和供试品溶液