虾青素对小鼠急性乙醇肝损伤的保护作用.docVIP

　　虾青素对小鼠急性乙醇肝损伤的保护作用 【摘要】 目的： 研究虾青素对乙醇所致小鼠急性化学性肝损伤的保护作用。方法： 雄性小鼠60只，随机分为正常对照组、急性乙醇肝损伤模型组、联苯双酯阳性对照组(15 mg/kg)以及虾青素低、中、高剂量组(10，15,20 mg/kg)共6组。测定并比较各组小鼠肝脏系数，血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶（GSHpx）活性与丙二醛(MDA)含量；测定肝组织中SOD,GSHpx活性,MDA含量以及组织病理系数。结果： 各剂量虾青素均能升高急性乙醇肝损伤小鼠血清与肝组织中SOD,GSHpx活性(Plt;0.01)，降低血清ALT,AST活性(Plt;0.01)，降低血清与肝组织MDA含量(Plt;0.01)，并能不同程度地改善肝脏病理组织损伤。结论： 虾青素对乙醇所致急性肝损伤具有预防性保护作用。 【关键词】 虾青素； 乙醇肝损伤； 抗氧化 　　［Abstract］ Objective: To study the protective effects of astaxanthin against the acute alcohol liver injury in mice and research its possible mechanism for offering scientific basis of its health function. Methods： Randomly to distribute 60 male mices to control group, acute alcohol liver injury model group, DDB group(15 mg/kg) and loiddle, high dose group s of astaxanthin(10, 15, 20 mg/kg), and to determine and pare liver index bet alanine transaminase(ALT),aspartate transaminase(AST),superoxide dismutase(SOD),glutathione perioxidase(GSHpx) activities,malondialdehyde(MDA) content, liver SOD,GSHpx activities,MDA content and liver tissue pathology index to be assayed. Results： Treatment and liver tissue SOD,GSHpx activities(Plt;0.01), decrease serum ALT,AST levels(Plt;0.01) and MDA content in liver tissue(Plt;0.01). Pathology index shoeliorate the liver injury in different degree. Conclusion： Astaxanthin shoice. 　　［Key l丙酮-正己烷萃取。静置2 h后，将脂溶性相收集（反复萃取直至水相成无色）。再利用减压旋转蒸发仪进行提取液浓缩处理。 　　1.2.2 虾青素提取液柱色谱纯化 （1）装柱 将活化好的氧化铝装填于玻璃层析柱中，装填高度为12 cm，用正己烷润湿。（2）洗脱 分别取2 ml虾青素提取液上柱，用50 ml正己烷-丙酮淋洗，收集洗脱液。将洗脱液用氮气吹干制粉，装入充满氮气的玻璃瓶内，-70℃储存备用。 　　1.3 虾青素鉴定 　　参照全反式虾青素标准品，根据其HPLC中保留时间和紫外可见吸收光谱的特征峰进行鉴定。得到的虾青素提取液经过过滤后用高效液相色谱分离。色谱柱：C Carotenoid S5(4.6 mm×250 mm)；流动相A：乙腈-甲醇（75∶25）;流动相B：MTBE；流动相A与B中分别加入0.05%三乙胺作为改性剂防止虾青素降解；线性梯度洗脱：B在8 min内由0%增加至55%；8～35 min B维持55%；35～40 min B由55%减至0%；流速1.0 ml/min;检测波长： λ/nm=475；波长范围260～700 nm；进样量20 μl。收集后观察其光谱特征峰行为［3］。色谱和光谱分析结果表明实验所用灌胃物为全反式虾青素，纯度为95%。 　　1.4 动物实验 　　1.4.1 乙醇诱导动物急性肝损伤模型的建立 将60只小鼠（购自中国军事医学科学院实验动物养殖中心，医动字第07231号）随机分组，设空白对照组、急