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植物交替氧化酶(aox) 在大肠杆菌中优化表达(aox)
云 南 植 物 研 究 2007 , 29 ( 1) : 74 ～78
Acta Botanica Yunnanica
植物交替氧化酶 ( AOX ) 在大肠杆菌中优化表达
1, 3 2 3 3
王雅英 , Moore A L , 杨盛昌 , 田惠桥
( 1 福建 省漳 州市农 业科 学研究所 , 福 建 漳州 363 005 ; 2 School of B iological Sciences , University of Sussex ,
BN 1 9 QG UK ; 3 厦 门大学 生命科 学院 , 福建 厦 门 361005 )
摘要 : 植物交替氧化酶 ( Alternative Oxidase , AOX) 位 于高等植物线粒体 内膜 , 从细胞色素途径的辅酶 Q
分岔 , 催化 4 个 电子还原氧分子形成水的另一终端氧化 酶 。分离纯化有活性的 AOX 比较 困难 。本文研究
AOX 原核表达 , 选择 pFLAG-1 分泌表达载体 , 用异 丙基硫代-β-D-半乳糖苷 ( IPTG) 诱 导 AOX 优化表达,
pFLAG- 1-AOX 大肠 杆 菌优 化表达 条件 为 : 宿主 DH5α、温度 37℃、细胞密度 OD = 0 . 6、IPTG 浓度 0 .2
600
mmo?l L , 诱导后 60 min 收获细胞 ; 获得少量可溶的细胞外周质 AOX 和大量不溶 的 AOX , 为深入研 究 AOX
打下基础 , 同时为研究膜蛋 白原核表达提供依据 。
关键词 : 交替氧化酶 ( AOX) ; 大肠杆菌 pFLAG-1 表达系统 ; 超量表达
中图分类号 : Q 945 文献标识码 : A 文章编号 : 0253 - 2700 (2007) 01 - 074 - 05
Optimal Expression of Alternative Oxidase in Escherichia coli
1 , 3 2 3 3 **
WANG Ya-Ying , MOORE A L , YANG Shen-Chang , TIAN Hui-Qiao
( 1 Agr icu ltural I nstitute , Zhangzhou 363 005 , Chin
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