猪去氧胆酸与bsa 相互作用研究 - 西南民族大学学报（自然科学版）.pdf

第40 卷第4 期 西南民族大学学报·自然科学版 Jul 2014 Journal of Southwest University for NationalitiesNatural Science Edition ___________________________________________________________________ doi: 10.3969/j.issn.1003-4271.2014.04.06 猪去氧胆酸与BSA 相互作用研究 仇丽颖, 严平, 沈安静, 刘晖 (西南民族大学化学与环境保护工程学院, 四川 成都 610041) 摘 要: 目的: 采用荧光光谱法研究猪去氧胆酸(HDCA)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用. 方法: 根据 25 ℃及 37℃温 度下HDCA 对BSA 的荧光猝灭作用, 通过Stern-volmer 方程和Lineweaver-Burk 双倒数方程计算反应的猝灭常数和形成 常数以判断荧光猝灭类型, 采用双对数方程计算HDCA 与BSA 的结合常数(K )和结合位点数(n), 最后采用热力学公式 A 计算反应前后焓变和熵变确定两者结合的主要作用力类型. 结果: HDCA 对BSA 的荧光淬灭作用属于静态荧光淬灭. 在 温度25 ℃和37℃时, HDCA 与BSA 的结合常数分别为0.258×106 L·mol-1 和0.453×104 L·mol-1, 结合位点数分别0.92 和 -1 -1 -1 0.62. 由于热力学参数焓变(ΔH -258.72 KJ·mol )和熵变(ΔS -0.76 J·mol ·K )均小于零, 因此确定HDCA 与BSA 之间的 作用力主要为氢键和范德华力作用. 结论: HDCA 与BSA 通过氢键和范德华力形成复合物, 经静态猝灭机制引起BSA 内源性荧光猝灭. 关键词: 猪去氧胆酸; 牛血清白蛋白; 荧光光谱 中图分类号: R917 文献标识码: A 文章编号: 1003-4271(2014)04-0504-05 猪去氧胆酸(Hyodesoxycholic Acid, HDCA, 3α, 6α-二羟基-5β-胆烷酸)是从猪胆汁中提取的一种胆烷酸, 具有 [1] 降血脂、镇痉、抑菌等作用 , 是很多中成药如清开灵系列产品、胆酸止咳片、胆黄片、霍胆丸、胆香鼻炎片的 主要有效成分, 因此被作为含量测定的检测对象, 以控制药品的质量. 然而, 药品疗效不仅与其外在质量息息相 关, 更取决于药物或其活性代谢物在体内的存在状态和浓度, 因此药动学研究有助于对药物疗效或毒性做出正 确评价, 也是制定安全有效给药方案的基础. 国内有关猪去氧胆酸的药动学研究极少, 仅见于清开灵注射剂的 [2-3] 研究 . 白蛋白是血浆中含量最高的载体蛋白, 主要与有机酸药物结合. 药物进入体循环后与白蛋白结合, 将不能 跨膜转运, 储存于血浆中, 暂时失去药理作用. 因此, 药物与血浆蛋白结合能力的高低直接影响药物的临床疗效, 是药动学研究的一个重要方面. 但猪去氧胆酸是否能与白蛋白相互作用的研究尚未见报道. 为阐明猪去氧胆酸与白蛋白相互作用的特征, 本研究采用荧光光谱法探索猪去氧胆酸与牛血清白蛋白(BSA) 荧光猝灭类型, 计算出两者结合参数, 确定了两者结合的主要作用力类型. 研究结果可为探讨猪去氧胆酸在体 内的转运