鲢生长激素cdna 表达载体构建及在大肠杆菌中的表达 - 水产学报.pdfVIP

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2017-09-02 发布于天津
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鲢生长激素cdna 表达载体构建及在大肠杆菌中的表达 - 水产学报

26 3 Vol. 26, No. 3 2002 6 JOURNAL OF FISHERIES OF CHINA June, 2002 文章编号: 1000- 0615( 2002) 03- 0201- 05 cDNA 1 2 2 陈松林 , Y . Hong , M . Schartl ( 1. , , 266071; 2. Biocenter of University Wuerzburg , Wuerzburg 97074) : RT ) PCR mRNA GH cDNA , 1. 2kb 1. 2kb GH cDNA pBluescript KSII+ ( pBSKSII+ ) , pBS- scGHcDNA ; NdeI cDNA , pRSET5b , GH cDNA pRSET- scGHBL21( DE3) , IPTG , GH Western GH : ; cDNA; ; : S917 :A Construction of expression vector of growth hormone cDNA from Hyp op hthalmichthys molitrix and its expression in Escherichia coli 1 2 2 CHEN Song-lin , Y. HONG , M. Schartl (1. Key Labf or Sustainable Utilization of Marine isheries Resources Certfi icated by theMinistry of Agriculture, Yellow Sea isheries Research Institute, Qingdao 266071, China; 2. Biocenter of University Wuerzburg , Wuerzburg 97074, Germany) Abstract: Total RNA was isolated from silver carp ( Hypophthalmichthys molitrix ) pituitaries. The cDNA fragment of 1. 2 kb encoding growth hormone ( GH) was amplified by reverse transcription polymerase chain reaction (RT- PCR) using total RNA astemplate. The amplified cDNA was inserted at the EcoRI site in vector pBluescipt KSII+ and resulted in plasmid pBS - scGHcDNA. GH cDNA fragment of 1 kb w ithout signal peptide sequence was amplified using pBS - scGHcDNA as template and introduced to expression vector pRSET5b, generating scGH ex