一种新的褐藻胶寡糖制备方法———氧化降解法 - 海洋科学.pdf

研究报告REPORTS 一种新的褐藻胶寡糖制备方法———氧化降解法 1 1, 2 1 1 杨 钊 , Li Jin- in , 张真庆 , 管华诗 p g (1.中国 洋大学 洋药物与食品研究所, 山东青岛 266003;2.Institute of Medical Biochemistry and Microbiolo- gy, Uppsala University, Uppsala S-75123, S eden) 摘要:建立了一种新的褐藻胶寡糖的制备方法, 即氧化降解法。通过褐藻胶来源的聚甘露糖醛 酸(PM)在不同浓度的过氧化氢、不同温度和不同反应时间下降解优选降解条件。以包含 3～ 11 糖单体的寡糖混合物为目标产物, 以相应的降解产物的平均分子质量为 1500u 为选择标准, 获得氧化降解法的最佳条件:过氧化氢浓度 5%, 反应温度 90℃, 降解时间 2h。以该条件降解 PM 获得的降解产物经圆二色谱、紫外光谱及红外光谱测定表明, 制备的寡糖保持了甘露糖醛 酸的结构特点。提示该方法可用于褐藻胶寡糖的制备。 关键词:过氧化氢;降解;褐藻胶;寡糖 中图分类号:R284 文献标识码:A 文章编号:1000-3096(2004)07-0019-03 褐藻胶(algin)是褐藻细胞壁的填充物质, 是由甘 1实验材料 露糖醛酸 (Mannuronic acid, M)和古罗糖醛酸 (Guluronic acid, G)结合而成的直链线性嵌段型高聚 1.1原料与试剂 4 6 1 PM 由中国 洋大学兰太药业有限公司提供, 物。其分子质量较大, 在 10～ 10u 之间 。如此高的 分子质量, 使其应用受到限制。通过各种降解方法制 GPC测定方法测定分子质量为 8235u (大约为 40个 备的褐藻胶寡糖, 在糖化学、糖生物学、糖工程以及糖 甘露糖醛酸残基), 根据其圆二色谱图确定其甘露糖醛 类药物研究等领域具有重要的研究价值。近年来, 褐 酸含量在 95%以上。所用化学试剂均为分析纯试剂。 藻胶寡糖的生物活性研究取得了重要进展, 特别是在 1.2实验仪器 2 3 4 515型高效液相色谱仪, 410型示差检测器 (RI 抗肿瘤 、 促进生长 及抗老年痴呆 等研究方面取 得了显著进展。褐藻胶可以用很多方法进行降解, 包 detector), 均为美国Waters公司;TSK G 3000PWXL (7.8 括酶降解法、物理降解法和化学降解法。如聚甘露糖 mm×300mm)凝胶柱, 日本Tosoh 公司;J-715圆二 醛酸(PM)裂解酶和聚古罗糖醛酸(PG)裂解酶的降解 色谱仪, 日本Jasco 公司;NEXUS-470智能型红外光 机理为 -消除反应, 可以断裂 1※4糖苷键, 在非还β 谱仪, 美国Nicolet 公司;R-410型旋转蒸发仪, 瑞士 5 原端C4～C5之间形成双键 。物理降解法包括辐射 法、超声降解法等,一般与其他降解方法一起使用, 降 6 解产物的极限分子质量为 50ku左右, 不易制得寡糖 。 化学降解法以酸降解为主,使用的酸包括草酸、盐酸、 7 收稿日期:2004-03-30;修回日期:2004-05- 12 硫酸和甲酸等 。酸降解法存在的缺点是反应耗时 基金项目:国家基础研究重大项目前期研究专项: 洋生物 长, 一般需 4～ 12h, 且三废污染严重, 产品外观色泽 多糖的化学与生物学研究———生物细胞膜“